生体硬組織に含まれるタンパク質の機能と起源の研究

生物硬组织中蛋白质的功能和来源研究

• 批准号: 08740401
• 负责人: 遠藤 一佳
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08740401/
• 关键词: 貝殻タンパク質; エナメロイドタンパク質; バイオミネラリゼーション; 硬組織; 結晶内タンパク質; 化石タンパク質; 分子古生物学

本年度は,軟体動物(ホタテガイ)の殻内タンパク質,腕足動物(ホウズキチョウチンガイ)の殻結晶内タンパク質ICP-1,および脊椎動物(ネズミザメ)のエナメロイドタンパク質についての研究を行った.ホタデガイの殻内タンパク質については,殻から抽出した水溶性画分を電気泳動により精製し,エドマン法によりアミノ末端のアミノ酸部分配列を決定した.その結果,ホタデガイの殻には数種類のサイズの異なる水溶性タンパク質が含まれるが,それらは,いずれも共通のアミノ末端配列を持ち,しかもそれぞれが2種類のペプチドが結合してできている,という意外な事実を示唆する結果を得た.決定された配列には予想通り酸性アミノ酸が多く含まれていたが,その配列はこれまでに知られたものとは異なることも分かった.さらに,これらのタンパク質,および腕足動物のICP-1について,それぞれのタンパク質をコードする遺伝子の塩基配列を決定すべく,外套膜より抽出したmRNAからcDNAを合成し,PCR法により目的とする断片の増幅を試みた.その結果,いずれも予想されるサイズのDNAが得られた.現在これらのDNA断片のクローニングを行い,構造の解析を行っている.ネズミザメのエナメロイドタンパク質については,その粗調製物および電気泳動による精製物のそれぞれに対する抗体を作製し,エナメロイドタンパク質の硬組織内での発現パターンを解析した.その結果,エナメロイドタンパク質は,歯のエナメロイド中の層状構造の発達と関連して発現すること,また象牙質の形成を行う間充織から分泌されている可能性が高いことなどが明らかになった.また,このエナメロイドタンパク質はアミノ末端がブロックされていることも明らかとなり,今後クリーブランド法によりこのタンパク質の酵素消化断片を精製し,アミノ酸配列を決定する方針である.

This year, the body parts (body parts), the brachial and foot devices (brachial and foot animals), the ICP-1, the vertebrae (vertebrae), the animals (vertebrae), the bodies of the vertebrae (vertebrae), the animals of the spine (vertebrae), the body parts of the body, the body parts of the This method is used to determine the concentration of acid in the end of the electrophoresis. in this way, the water-soluble painting is extracted, and the electrophoretic activity is used to determine the concentration of acid in the end of the column. According to the results of the test, the results show that the water solubility of the water-soluble system contains a series of devices at the end of the system, and the results show that the results of the accident are satisfactory. Decide whether you want to use acid, acid, acid and acid. In this paper, the brachial and foot devices were used to determine the size of the ICP-1, the external membrane was extracted from the mRNA, the cDNA was synthesized, and the fragments were tested by the PCR method. As a result, I would like to thank you for the success of DNA. Now, in order to analyze the DNA fragments, we need to analyze the lines. In the hardware group, there was no significant difference between the two groups, and the results showed that there was no significant difference between the control group and the control group. According to the results of the test, the results showed that the quality of the animal was detected in the middle of the test, and the ivory tissue was formed. The possibility of tissue secretion was high. In the future, the enzyme digestion fragments were used to digest the essence of the enzyme digestion fragments, and the acid column was used to determine the concentration of the enzyme digestion fragments.

项目成果

Feldman,R.M: "Pinnotheres laquei,a tiny crab commensal within the brachioped Laguens rubellus" Journal Paleontology. 70(2). 303-311 (1996)

Feldman，R.M：“Pinnotheres laquei，腕足动物 Laguens rubellus 中的一种小蟹共生体”《古生物学杂志》。