スイレン科植物の花の形態形成と進化に関する分子生物学的研究

睡莲科植物花形态发生和进化的分子生物学研究

• 批准号: 08740658
• 负责人: 上原 浩一
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08740658/
• 关键词: スイレン科; コウホネ; ヒツジグサ; 花形成遺伝子; MADS-box; NJM-1; NJM-2; NTM-3

スイレン科植物のコウホネ属コウホネNuphar japonicum、スイレン属ヒツジグサNymphaea tetragona、オニバス属オニバスEuryale feroxの発達過程の花芽からmRNAを抽出し、MADS-boxの保存性の高い塩基配列を基に作ったディジェネレートプライマーを用いて3'race法を行い、MADS-boxをもった花形成遺伝子のcDNAを合成、その遺伝子の3'側の塩基配列を決定した。そして判明した塩基配列をもとに新たなプライマーを設計し5'race法を行って、遺伝子の全塩基配列の決定を試みた。本年度は、コウホネのNJM-1(1020塩基対からなり217個のアミノ酸からなる蛋白質をコードする)、NJM-2(1118塩基対からなり226個のアミノ酸からなる蛋白質をコードする)、およびヒツジグサのNTM-3(1130塩基対からなり243個のアミノ酸からなる蛋白質をコードする)の3つの遺伝子についてクローニングしmRNAの全塩基配列を決定した。これらについてそのアミノ酸配列をいままでにクローニングされた他の植物の花形成遺伝子と比較し分子系統樹を構築したところコウホネのNJM-2とヒツジグサのNTM-3はシロイヌナズナのAGに代表されるクラスCの遺伝子群に、コウホネのNJM-1はシロイヌナズナのPIに代表されるクラスBの遺伝子群に含まれることがわかった。NJM-1はクラスB遺伝子群(AP3遺伝子に代表されるもの、PI遺伝子に代表されるものの2つのサブグループにわけられる)のうちでPI遺伝子のサブグループに入り、シロイヌナズナPI、キンギョソウGLOほかペチュニア、タバコなどの双子葉植物で単離された相同遺伝子より先に分岐していることがわかった。またNJM-2とNTM-3はクラスC遺伝子群のなかで早くに枝分かれしているものの裸子植物などからとれたDAL2などの遺伝子群よりは後に分岐していた。またNJM-2とNTM-3スイレン科としてよくまとまっており機能的には相同であると推定された。そのほかにコウホネ14遺伝子、ヒツジグサ11遺伝子、アニバス4遺伝子を単離し3'側の塩基配列を決定、5'race法を進めている。今後塩基配列の決定とともにin-situハイブリダイゼーションを行い各遺伝子の発現パターンを解析する予定である。

The gene expression of flower bud in Euryale ferox development process was extracted. The MADS-box gene was used for the high level gene alignment of preservation. The MADS-box gene was synthesized by 3'race method. The cDNA of flower bud formation gene was synthesized. The gene alignment of flower bud was determined by 3'race method. To determine the base alignment of the new design, the 5'race method is used to determine the base alignment of the new design. NJM-1 - 100 (1020 base pairs, 217 base pairs, protein pairs), NJM-2 (1118 base pairs include 226 amino acid residues of protein), 3 amino acid residues of NTM-3(1130 base pairs include 243 amino acid residues of protein), and 3 amino acid residues of mRNA. The NJM-2 and NTM-3 of the NJM-1 of the NJM-2 of the NJM-1 of NJM-1 is a member of the B gene subgroup (AP3 gene represents the first two genes, PI gene represents the second two genes), and PI gene represents the first two genes. Also, NJM-2 and NTM-3 diverged from each other in the past and later. NJM-2 and NTM-3 are the same. The 14 genes, the 11 genes, the 4 genes, the 3'-side gene alignment, the 5'race method, and the 5'-side gene alignment are determined. In the future, the determination of the base alignment and the analysis of the occurrence of each gene will be determined.