ハエトリソウを用いた運動力を発生させる分子機構の解明
利用维纳斯捕蝇草阐明产生动能的分子机制
基本信息
- 批准号:22KJ0450
- 负责人:
- 金额:$ 3.33万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2023
- 资助国家:日本
- 起止时间:2023-03-08 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
RNA-seqデータを解析し,標的とするアクアポリンおよび細胞間連絡の関連遺伝子群の配列を同定・単離し,過剰発現株およびノックアウト株用のベクターをハエトリソウに導入した。CRE-loxPシステムを始めとした複数の遺伝子カセットを発現するベクターを用いたところ,蛍光マーカーであるGCaMP6fが細胞で十分に発現しないことが分かった。特に,細胞内カルシウムイオン濃度の低い基底状態におけるGCaMP6fは輝度が低く形質転換体の蛍光スクリーニングが難しいことが新たに明らかとなった。そこで,GCaMP6f配列にT2A配列と赤色蛍光タンパク質mScarlet-I配列を付加して発現させる,もしくは過剰発現させる遺伝子にmScarlet-I配列を付加して発現させることで,細胞内カルシウムイオン濃度に依存しない蛍光スクリーニングベクターを作製した。さらに輝度の高いLED光源を備えた蛍光実体顕微鏡を導入することで蛍光スクリーニングに成功した。新たに作製したベクターを用いてPDLP6遺伝子のハエトリソウにおけるホモログの過剰発現株の樹立に成功した。また,運動時の形態変化を捉えるため,二台のハイスピードカメラを用いた撮影動画からDirect Linear Transformation methodによって経時的な形態変化を三次元的に明らかにすることに成功した。また,粒子画像流速測定法 (PIV法) によって微小な領域における運動時の変位ベクトルの抽出に成功した。
By analyzing the RNA-seq data, the target RNA molecule and the arrangement of related gene subgroups of cell-cell connections are determined and separated, and the information used by the discovery plant and the use of RNA in the discovery plant is introduced into the device using a cloud-based technology. CRE-loxP system starts with a plurality of cells, and the cells begin to appear with a plurality of cells. In particular, the intracellular concentration and low basal state of GCaMP6f brightness are low in the form of a substance and a new light source. GCaMP6f alignment T2A alignment and red fluorescence alignment were increased during the development of GCaMP6f alignment, and the mScarlet-I alignment of GCaMP6f alignment was increased during the development of GCaMP6f alignment. LED light source with high brightness is successfully introduced. The new system was successfully established by using PDLP6 as a vector. The shape transformation of the motion time is captured by the two sets of Linear transformation method. The shape transformation of the motion time is captured by the two sets of linear Transformation method. The shape transformation of the motion time is captured by the three dimensions of linear Transformation method. The particle image velocity measurement method (PIV method) was successfully used to extract particles in small areas.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:エドワード ジャーマニー;中島 由香里;塩田 拓也;Hiraku Suda and Masatsugu Toyota;須田 啓
- 通讯作者:須田 啓
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