ミジンコ卵のin vitro発生系を用いる水圏環境毒性物質の評価手法の開発

利用水蚤卵体外发育系统开发水生环境有毒物质评价方法

• 批准号: 08680583
• 负责人: 太田 敏博
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680583/
• 关键词: ミジンコ; 環境毒性物質; エチレンチオウレア; 催奇形; 単為生殖卵; 発生毒性

ミジンコ(Daphnia magna)の発生過程における環境毒性物質の影響を高感度で効率的に評価するための手法を開発、普及させることを最終的な目標として、そのための基礎的データを集積する目的で研究を行った。1.卵のin vitroでの孵化に対する水温、水質など環境要因の影響を詳細に調べ、再現性のよい標準培養条件を検索した。その結果、Elendt M7培地を用いて23℃で培養することにより、安定して95%以上の孵化率を達成することが出来た。2.毒性物質の作用の解析のため、産卵直後の卵(Stage 1-2)を育房から取りだしてマイクロプレートに移しin vitroで培養した。数種類の毒性物質について、これを培養開始時に添加して発生孵化過程に対する毒性を観察した。発生途中で死亡する卵の割合と、孵化した個体の形態的異常等を調べた。3.水道水の塩素処理過程で副成物として生成することが知られている、変異原性を有する化合物MXの毒性について調べた。致死濃度を幼若個体と卵とで比較した結果、ほぼ同程度であることが判明した。MXの作用によると考えられる遺伝的変異はこれまでのところ観察されなかった。4.アミノプテリン、メソトレキセート、エチレンチオウレアなどの催奇形誘発剤の作用について検索した。アミノプテリン、メソトレキセートによる奇形の誘発は検出できなかったが、エチレンチオウレアを20-40μg/mlの濃度で作用させると体殻の変形した個体の出現が有意に増加した。これらの形態異常をもつ個体は脱皮が出来ないために生存できないが、殻の形態異常は毒性検出法の指標の一つになると考えられた。

Daphnia magna's development process in the impact of environmental toxicity, high sensitivity, evaluation of the method of development, popularization, and the ultimate purpose of the collection of the purpose 1. Eggs incubated in vitro were carefully adjusted for water temperature, water quality, environmental factors, reproducibility, and standard incubation conditions. The results showed that Elendt M7 was cultured at 23℃, and the incubation rate was above 95%. 2. Analysis of toxic substances, eggs after oviposition (Stage 1-2) A number of toxic substances were added at the beginning of incubation and observed during incubation. During development, egg cleavage, hatching, and morphological abnormalities are regulated. 3. The by-product is produced during the treatment of water elements, and the toxicity of compound MX is regulated. Lethal concentration is the result of comparison between young individuals and young adults. The role of MX is to examine the differences between the two. 4. The function of the trigger agent is to detect the change of temperature, temperature and temperature. The effect of concentration of 20-40μg/ml on the induction of abnormal shape in the body and the appearance of abnormal shape in the body were intentionally increased. For example, the morphological abnormality of an individual is caused by peeling off the skin, and the morphological abnormality of a shell is caused by the index of toxicity detection.

项目成果

Tokishita,S.: "Cloning and analysis of a cDNA encoding two-donain hemoglobn chain from water flea Daphuia magna" Gene. (in press). (1997)

Tokishita,S.：“编码来自水蚤 Daphuia magna 的双核血红蛋白链的 cDNA 的克隆和分析”基因。