Elucidation of HBV Survival Strategy by Inducing Host Immune Exhaustion Using Innovative Animal Models

使用创新动物模型诱导宿主免疫衰竭来阐明 HBV 生存策略

• 批准号: 22K19528
• 负责人: 小玉 尚宏
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19528/
• 关键词: HBV; マウスモデル; T細胞疲弊; B型肝炎; 免疫疲弊

本研究は、Hepatitis B virus(HBV)による慢性肝炎・肝線維化・肝発癌、そしてHBV特異的細胞傷害性Tリンパ球（CTL）の免疫疲弊が生じる新たな動物モデルを用いて、免疫疲弊誘導を介したHBV生存戦略の分子機序を解明し、HBVの体内からの完全排除を目指した新たな治療法を開発することを目的とした。ニチシノン補給に肝細胞の生存を依存するフマリルアセト酢酸ヒドラーぜ（FAH）欠損マウス（BL6由来）の肝臓に、FAHのcDNAとHBVをタンデムに組み込んだSleeping Beauty（SB）トランスポゾンベクターを尾静脈急速静注法（HVTi法）で導入し、ニチシノンを中止することで、免疫能を保持しながらHBVが肝細胞から排除されない新たなB型慢性肝炎モデルマウスを作出した。このマウスでは、HBVの肝内持続感染・ウイルス血症とそれに伴う慢性肝炎が10ヶ月以上持続し、CTLが経時変化と共に疲弊し、それに比例してウイルス血症の増悪が認められ、B型慢性肝炎患者における免疫動態が模倣されていた。同マウスの肝臓から単核球を単離しシングルセルRNA-seq解析を実施した。その結果、HBVマウスでコントロールマウスと比べて、CTLクラスターの中で、PD-1高発現の疲弊CTLの頻度が有意に増加していた。また、HBVマウスではNK細胞の活性化並びにマクロファージの機能異常が認められた。以上より、これらの免疫異常がHBV持続感染並びに慢性肝障害に関与している可能性が示唆された。

This study youdaoplaceholder7, Hepatitis B Virus get (HBV) に よ る chronic hepatitis, liver line dimensions, 発 liver carcinoma, そ し て HBV specific cell damaging T リ ン パ ball (CTL) の immune weakness born disadvantages が じ る new た な animal モ デ ル を with い て, immune weakness disadvantages induced を interface し た HBV survival 戦 slightly の molecular machine sequence を interpret し, HBV の body か ら の completely ruled out を refers し た new た Youdaoplaceholder0 therapy を development する する とを objective と た た ニ チ シ ノ ン supplies の に liver cells survive を dependent す る フ マ リ ル ア セ ト boggy acid ヒ ド ラ ー ぜ (FAH) owe loss マ ウ ス (the BL6 origin) crucial の liver に, FAH の cDNA と HBV を タ ン デ ム に group み 込 ん だ Sleeping Beauty (SB) ト ラ ン ス ポ ゾ ン ベ ク タ ー を caudal vein rapid static note method (HVTi method) で import し, ニ チ シ ノ ン を suspended す る こ と で, immune can keep し を な が ら が HBV hepatocellular か ら exclude さ れ な い new た な type of chronic hepatitis B モ デ ル マ ウ ス を make し た. こ の マ ウ ス で は, の intrahepatic hold 続 HBV infection ウ イ ル ス hematic disease と そ れ に with う chronic hepatitis が above 10 ヶ month hold 続 し, CTL が 経 - と altogether に weakness cons し, when そ れ に proportion し て ウ イ ル ス hematic disease の raised 悪 が recognize め ら れ, type of chronic hepatitis B patients に お け る immune dynamic imitation が さ れ て い た. Same as ウス ウス, <s:1> liver, ら単, nuclear sphere, を単, <s:1> シ, グ, セ, RNA-seq analysis を, application た. そ の results, HBV マ ウ ス で コ ン ト ロ ー ル マ ウ ス と than べ て, CTL ク ラ ス タ ー の で, PD - 1 high 発 の now exhausted disadvantages CTL の frequency が intentionally に raised plus し て い た. Youdaoplaceholder0, HBV ウスで ウスで ウスで NK cells <s:1> are activated and びに ロファ ロファ ジ ジ <s:1> function is abnormal が recognized められた. Above よ り, こ れ ら の dysimmunity が hold 続 HBV infection and び に chronic liver handicap of に masato and し て い が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

免疫系を保持する新規B型慢性肝炎モデルマウスの作成と免疫応答解析

保留免疫系统的新型慢性乙型肝炎模型小鼠的创建及免疫反应分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 滋野 聡;小玉 尚宏;村井 一裕;山田 涼子;疋田 隼人;阪森 亮太郎;巽 智秀;竹原 徹郎
• 通讯作者: 竹原 徹郎

Olaparib enhances the anti-viral effect of CRISPR/Cas9 therapy targeting HBV genome via NHEJ-mediated DNA repair machinery

奥拉帕尼通过 NHEJ 介导的 DNA 修复机制增强针对 HBV 基因组的 CRISPR/Cas9 疗法的抗病毒效果

• 发表时间: 2022
• 作者: Kazuhiro Murai;Takahiro Kodama;Hayato Hikita;Emi Sometani;Jihyun Sung;Akiyoshi Shimoda;Makoto Fukuoka;Satoshi Shigeno;Yuki Tahata;Akira Nishio;Ryoko Yamada;Ryotaro Sakamori;Tomohide Tatsumi;Tetsuo Takehara
• 通讯作者: Tetsuo Takehara

CRISPR/Cas9によるHBVゲノム切断とDNA 修復経路阻害併用によるB型肝炎根治を目指した新規HBV治療の開発

开发一种新型 HBV 治疗方法，旨在通过将 HBV 基因组切割与 CRISPR/Cas9 和 DNA 修复途径抑制相结合来根除乙型肝炎

• 发表时间: 2022
• 作者: 村井一裕;小玉尚宏;竹原徹郎
• 通讯作者: 竹原徹郎

B型肝炎根治を目指したCRISPR/Cas9によるウイルスゲノム切断とDNA 修復経路阻害併用療法の開発

开发使用 CRISPR/Cas9 病毒基因组切割和 DNA 修复途径抑制的联合疗法，旨在彻底治愈乙型肝炎

• 发表时间: 2022
• 作者: 村井一裕;小玉尚宏;竹原徹郎
• 通讯作者: 竹原徹郎

免疫系を保持した新規B型慢性肝炎モデルマウスを用いたTLR7アゴニストの治療効果の検討

使用保留免疫系统的新型慢性乙型肝炎小鼠模型检查 TLR7 激动剂的治疗效果

• 发表时间: 2022
• 作者: 滋野 聡;小玉 尚宏;竹原 徹郎
• 通讯作者: 竹原 徹郎