Development of a breakthrough molecular targeted therapy against deep cancer using near-infrared light with longer wavelength (NIR-II).

使用较长波长的近红外光 (NIR-II) 开发针对深部癌症的突破性分子靶向疗法。

基本信息

批准号：
22K19576
负责人：
森田直樹
金额：
$ 4.16万
依托单位：
National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19576/
关键词：
深部がん分子標的療近赤外光 NIR-II NIR-II応答型遺伝子プロモーター

项目摘要

短波赤外光領域の波長900（1000）-1400nmの光（NIR-II）は、生体内深部まで到達可能で細胞傷害性も低いことが知られているが、NIR-IIを直接利用した生体内分子の光操作の研究は進んでいない。本研究では、NIR-IIに直接応答する新たな遺伝子の探索を行い、光操作にて生体内深部がん治療に応用可能かどうかを研究する。具体的には、出芽酵母（Saccharomyces cerevisiae）及び微細緑藻クラミドモナス（Chlamydomonas reinhardii）を用いて、NIR-IIに応答する遺伝子プロモーターの探索、同プロモーターを利用した細胞死誘導タンパク質の誘導発現とその腫瘍細胞への効果を細胞レベル及び動物レベルで検証することを目的とする。納入された近赤外照明の照射方法を検討し、2つの近赤外照明をフラスコを挟むように配置し、自然光が入らないインキュベーターの中でNIR-IIを照射することとした。また、出芽酵母及びクラミドモナスの野生株の培養条件、RNAサンプルを調製する細胞の検討を行った。出芽酵母は30℃、クラミドモナスは25℃で培養し、出芽酵母はOD600が1.0、クラミドモナスはOD680が1.0まで培養した。近赤外照射用のインキュベーターにフラスコごと移した後、サンプリングした（0 h）。その後、出芽酵母及びクラミドモナスに近赤外照射し、6時間後に再びサンプリングした。サンプリングしたした細胞は、　RNA later処理を施した後、各々凍結保存した。その後、それぞれの細胞からRNA抽出を行い、RNA-seq解析中である。

在短波红外光区中波长为900（1000）-1400 nm的光（NIR-II）已知能够在体内深处到达体内并具有低细胞毒性，但是对使用NIR-II体内分子的光持持续性的研究尚未取得进展。在这项研究中，我们将搜索直接对NIR-II响应的新基因，并研究是否可以使用照片操作将它们应用于体内深层癌症。具体而言，目的是寻找一种基因启动子，该基因启动子使用酿酒酵母和微生物藻藻reinhardii对NIR-II做出反应，并使用促进蛋白及其对细胞和动物水平的肿瘤细胞的作用来验证细胞死亡诱导蛋白的诱导表达。我们调查了辐照近红外照明的方法，并决定将两个近红外照明与烧瓶一起放置，并将NIR-II照射到一个不进入自然光的孵化器中。此外，研究了糖酵母和衣原体的野生菌株的培养条件，以及制备RNA样品的细胞。在30°C培养出萌芽的酵母菌，并在25°C培养衣原体，并在OD600至1.0处培养出芽的酵母，而衣原体为OD680至1.0。将烧瓶转移到孵化器中进行近红外照射，然后进行采样（0 h）。随后，萌芽的酵母和衣原体被近红外照射辐射，并在6小时后再次采样。将采样的细胞用后来的RNA处理，然后保存冷冻保存。然后从每个细胞中提取RNA，并分析RNA-Seq。