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生体高分子送達のための細胞内バリア突破型レクチンの開発

开发用于生物聚合物递送的细胞内突破屏障凝集素

基本信息

批准号：
22K19906
负责人：
佐野将之
金额：
$ 4.16万
依托单位：
National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞のマニュピレーションおよび疾患の治療を目的とした核酸などの生体高分子デリバリー技術は、現代の生物・医学研究において必須のものとなっている。また多くの疾患治療においては、特異性の低いキャリアを用いたdrug delivery system (DDS)は副作用を誘起する原因となるため、いかに標的細胞への特異性を高めるかが安全性の高い治療を達成するうえで重要になる。糖鎖結合タンパク質（レクチン）は、特定の糖鎖を認識して結合するタンパク質であり、その機能は細胞接着、シグナル伝達、免疫反応の獲得など多岐にわたっている。これまでに我々は細胞種特異的に結合するレクチンを確かめており、本研究では、レクチンを用い、核酸などの生体高分子を特定の細胞に導入するための技術の構築を目的としている。本年度は、レクチンに核酸を結合させるため、いくつかの核酸結合配列をレクチンに付加した組換えタンパク質を作製し、electrophoretic mobility shift assay (EMSA)により核酸との結合を検証した。緩衝液や反応時間の検討も合わせて行い、その結果、核酸に効率よく結合する組換えレクチンおよびその反応条件を得ることができた。また、蛍光標識したレクチンを用いて、細胞表面への結合についても検証を行った。さらに、核酸結合配列を付加したレクチンと核酸との複合体を形成させ、培養細胞への導入実験を行った。核酸とレクチンの反応量比や細胞への処理時間、培養条件などの検討を行うことで、核酸の導入に必要な因子について多くの知見を得ることができた。

Cell science and disease therapy are essential for biological polymer science and technology. The drug delivery system (DDS) has a low specificity and a high specificity in the treatment of multiple diseases. Glyco-lock binding proteins, specific glyco-lock binding proteins, cellular binding proteins, immune responses, and acquisition of multi-species. The aim of this study is to construct a technology for the introduction of nucleic acids into specific cells. This year, the nucleic acid binding assay (EMSA) was used to detect nucleic acid binding. Buffer solution, reaction time, reaction time In addition, the use of fluorescent logos and the combination of cell surfaces are carried out. In addition, nucleic acid binding and alignment are carried out to form nucleic acid complexes, culture cells and introduce them. The nucleic acid reaction time is shorter than that of the cell treatment time, the culture conditions are different, and the necessary factors for nucleic acid introduction are different.