集積回路への細胞固定による生体反応の制御と検出

通过将细胞固定在集成电路上来控制和检测生物反应

• 批准号: 22K19917
• 负责人: 樋口 ゆり子
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19917/
• 关键词: 細胞; 集積回路; クリック反応

本研究では、①細胞の作製、②集積回路の作製、③細胞の固定法の確立、④細胞―集積回路結合体の機能評価、の４つを行う。本年度は①③を中心に行った。発信および受信する細胞の構築：Wangらによって開発された光照射（460 nm）で転写が活性化される人工転写調節因子（Nat Methods 9, 266-269, 2012）を利用し、転写調節因子が結合するUAS配列の下流に蛍光タンパク質またはルシフェラーゼの発現配列を配したベクターを構築した。NFkB結合配列の下流に蛍光タンパク質の発現配列を配したベクターを作製した。後者のベクターをトランスフェクションした細胞に、LPSまたはTNFを添加すると蛍光タンパク質の発現が認められた。細胞固定法の確立：ガラス基板上にNH2とDBCO-polyethylene glycol (PEG)-NHSを反応させ、NH2とNHSの結合によりDBCOをコーティングした。アジト糖を用いた代謝標識法により細胞膜にアジド基を表出させ、アジド基とDBCOの反応により集積回路上に細胞を固定できた。

In this study, 1-cell cycle, 2-cell cycle, 3-cell fixation, 4-cell-cluster loop combination and 4-cell cycle were performed. This year's "13" center will be in line. In this paper, we use the following factors: the active device manual writing factor (Nat Methods 9266-269, 2012). In combination with the UAS configuration factor, we can use the following information to make sure that the configuration is based on the combination of two factors (Nat Methods 9266-269, 2012). NFkB is combined with the configuration column. The current configuration column is configured with the configuration column and the configuration column is configured. After that, please add the following information: LPS, TNF, light, and so on. Make sure that the cell fixation method is established: the NH2 DBCO-polyethylene glycol (PEG)-NHS reaction on the substrate, and the combination of the NH2 NHS and the cell DBCO. The sugar is labeled with the cell membrane marker to show that the cell is fixed on the circuit. The cell is fixed on the back of the DBCO.

项目成果

生体直交反応する官能基の細胞膜への導入によるクリック反応を介した細胞の固定

通过将生物正交反应官能团引入细胞膜，通过点击反应固定细胞

• 发表时间: 2022
• 作者: 〇樋口ゆり子;朱 程遠;山下富義
• 通讯作者: 山下富義