Establishment of cat multiorgan organoid-on-a-chip system

近年、患者由来の細胞をディッシュ上で三次元的に培養する方法として、オルガノイド培養法が開発された。我々はこれまでの研究活動においてオルガノイドを搭載可能な独自のオーガンオンチップシステムをデザインし、犬のオルガノイドを用いたウイルス灌流実験に使用可能であることを明らかにしたが、猫の複数の異なる臓器由来のオルガノイドを搭載した流路デバイスはいまだに開発されていない。そこで、本研究では、猫の多臓器オルガノイドを搭載したオーガンオンチップシステムを確立し、ウイルス性疾患やがんの相互作用メカニズムを明らかにする。今年度は猫乳がんオルガノイド細胞を流路デバイスに搭載し、灌流実験を実施した。最適な流速や、オルガノイドのサイズを検討したのちに、灌流の有無によるオルガノイドへの影響を検討した。また、抗がん剤としてトセラニブを長期間灌流した際の生存率への影響を検討した。灌流を行ったオルガノイドでは、生存率への影響はほとんどないことが分かった。一方で、トセラニブを灌流したオルガノイドでは、灌流しなかった場合に比べて生存率の減少が観察された。これらの結果から、流路デバイスでの抗がん剤の暴露は通常のアッセイと異なるメカニズムでオルガノイドの生存率を低下させる可能性が示唆された。今後は、灌流後のオルガノイドのRNAシークエンス解析を実施し、より詳細なメカニズムを明らかにするとともに、腸管や心臓細胞を搭載した状態での抗がん剤灌流の評価を行っていく予定である。

近年、患者由来の細胞をディッシュ上で三次元的に培養する方法として、オルガノイド培養法が開発された。我々はこれまでの研究活動においてオルガノイドを搭載可能な独自のオーガンオンチップシステムをデザインし、犬のオルガノイドを用いたウイルス灌流実験に使用可能であることを明らかにしたが、猫の複数の異なる臓器由来のオルガノイドを搭載した流路デバイスはいまだに開発されていない。そこで、本研究では、猫の多臓器オルガノイドを搭載したオーガンオンチップシステムを確立し、ウイルス性疾患やがんの相互作用メカニズムを明らかにする。今年度は猫乳がんオルガノイド細胞を流路デバイスに搭載し、灌流実験を実施した。最適な流速や、オルガノイドのサイズを検討したのちに、灌流の有無によるオルガノイドへの影響を検討した。また、抗がん剤としてトセラニブを長期間灌流した際の生存率への影響を検討した。灌流を行ったオルガノイドでは、生存率への影響はほとんどないことが分かった。一方で、トセラニブを灌流したオルガノイドでは、灌流しなかった場合に比べて生存率の減少が観察された。これらの結果から、流路デバイスでの抗がん剤の暴露は通常のアッセイと異なるメカニズムでオルガノイドの生存率を低下させる可能性が示唆された。今後は、灌流後のオルガノイドのRNAシークエンス解析を実施し、より詳細なメカニズムを明らかにするとともに、腸管や心臓細胞を搭載した状態での抗がん剤灌流の評価を行っていく予定である。