ストレスと睡眠指標との関連　腸内神経叢の関与

压力与睡眠指标的关系：肠神经丛的参与

• 批准号: 22K18667
• 负责人: 本多 真
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K18667/
• 关键词: 睡眠ポリグラフ検査; 酸化ストレス; グルタチオン; 腸内細菌叢; 短鎖脂肪酸; 睡眠の質; 睡眠障害

ストレス感受性には心理的要因だけでなく生物学的要因も関与する。腸内細菌叢はストレス感受性の一つの規定因子とされている。本研究では生物学的ストレス指標として、酸化ストレス指標かつ睡眠物質であるグルタチオン（GSH/GSSG）に注目し、酸化ストレス指標が睡眠の質にどのように影響するのか、さらに腸内細菌叢がストレス感受性と関連する環境因となるか検討することを目的とする。過眠症の鑑別診断目的で1泊２日の検査入院[睡眠ポリグラフ検査(PSG)-反復睡眠潜時検査(MSLT)]をする症例に過眠症病態研究への協力を依頼し、入院期間中に血液と糞便の収集を行う。2022.4-2023.3の期間に118例の患者が研究に同意し、血液92検体、糞便28検体を収集できた。糞便はリボソームRNA領域の増幅を行いT-RFLP(Terminal-Restriction Fragment Length Polymorphism)法で腸内細菌の系統分類解析および糞便中の短鎖脂肪酸定量を行った(テクノスルガラボに委託)。委託が年度末となったため結果は2023.4には未着となった。解析は2023年度に行う。血中の酸化ストレス指標(GSH、GSSG)は高速液体クロマトグラフィー(HPLC)によって検出・定量を行う。以前、脳脊髄液中のGSH/GSSGはホウ素ドープダイアモンド電極を用いたHPLC系で安定して測定可能であったが、血漿には夾雑物が多く適応できず、赤血球分画を対象とするとGSH濃度が非常に低値でアッセイ間の変動が大きい課題が判明した。試行錯誤を行い、最終的にGSHは、赤血球分画を解凍・除タンパク処理直後にHPLCにかけることで、信頼できる実験系を確立ができた。しかし１検体ずつ処理する必要が生じ、所要時間が延長してたため、まだ収集された検体の半数以下しか解析できていない。順次処理を進め、解析を行う予定である。

The main reason for sensitivity is psychological and biological. The gut bacterial flora is sensitive to a variety of factors. The purpose of this study was to investigate the effects of biological parameters such as GSH/GSSG on sleep quality and the environmental factors associated with gut bacterial susceptibility. The purpose of differential diagnosis of hypersomnia is to investigate the symptoms of hypersomnia during admission [PSG-MSLT] and collect blood and feces during admission. From April 2022 to March 2023, 118 patients consented to the study, 92 blood samples and 28 faeces samples were collected. T-RFLP(Terminal-Restriction Fragment Length Polymorphism) was used to analyze the phylogenetic analysis of intestinal bacteria and quantify short-chain fatty acids in feces. Entrusted year end Analysis of the 2023 Annual Report. Blood acidification index (GSH, GSSG) and high-speed liquid chromatography (HPLC) were used to detect and quantify the changes. In the past, GSH/GSSG in the serum was stable and stable, and the plasma was stable and stable, and the GSH concentration in the erythrocyte was very low. Trial error, final GSH, red blood cell analysis, thawing, removal, processing, HPLC, information, system establishment The time required for processing is prolonged, and the number of samples collected is reduced to less than half. Sequential processing, analysis, pre-determined.