廃水処理における除去メカニズム解明のためのウイルスの視覚的・特異的検出技術の開発

开发视觉和特异性病毒检测技术以阐明废水处理中的去除机制

• 批准号: 22K18818
• 负责人: 久保田 健吾
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K18818/
• 关键词: 視覚的検出技術

電子顕微鏡で生物を可視化するための方法として、非特異的に生物を染色可能な方法を開発した。本手法は生物細胞に結合し、かつペルオキシダーゼ活性を有するヘミンとチラミドシグナル増幅法を組み合わせることで、任意の重元素による染色が可能な手法である。手法の開発にあたり、まず、ヘミン濃度、反応時間、チラミドシグナル増幅法の最適化を行った。最適化は、蛍光標識チラミドを用いて純粋培養株を標的として行った。蛍光強度を画像解析ソフトで定量的に測定し、各反応条件において高い蛍光強度が得られる条件を探索して、条件を決定した。その後、複合微生物生態系のモデルケースとして汚泥サンプル、またミネラルなどの無機物を多く含むモデルケースとして土壌サンプルに適用してその有用性を確認した。次に、細胞の金元素による標識を行った。具体的にはヘミンを生物細胞に結合させた後、チラミドシグナル増幅法でビオチンを沈着させた。そして金ナノ粒子結合ストレプトアビジンを反応させ、ビオチン-ストレプトアビジン結合により金ナノ粒子を細胞に結合させた。最後に金増感反応により金ナノ粒子を肥大化させ、それを走査型電子顕微鏡(SEM)で観察した。金シグナルを確認することができ、またSEM-EDXによる元素マッピングにおいて存在箇所を示すことができた。今後は本手法がウイルスの可視化に適用可能かを検討していく必要がある。またジゴキシゲニンを標識した長鎖遺伝子プローブの合成に関する検討を開始した。

Electron microscopes can be used to determine the accuracy of bioassay, and non-specific biochemistry staining may be feasible. In this method, the activity of the combination of biological cells and cells is characterized by the combination of heavy element staining and the possible staining of heavy elements. in this method, the activity of the combination of biological cells and heavy elements can be detected by the method of combination and staining of heavy elements. The method uses the method to determine the accuracy, the response time, and the amplitude method to optimize the operation. The most important information is that you need to use the information you need to develop your information. The portrait of "light intensity" is analyzed, and the quantitative measurement of light intensity is analyzed, and the conditions are determined. After that, the complex microorganism is used to make sure that it is useful to make sure that it is not available in any way. The gold element of the secondary and cellular gold element is related to the identification line. After the specific biological cells are combined with each other, the amplitude method is used to make sure that the biological cells are sedated. The combination of the gold particles and the cells of the particles in the first half of the year. In the end, the metal has a negative effect on the metal particles, and the electronic micrometer (SEM) is used to monitor the metal. Please make sure that the elements of the SEM-EDX element exist as shown in the box. In the future, this technique may be used in the future because it is necessary to do so. You need to know that you need to make sure that you are interested in the synthesis of information about the beginning of the program.