非酵素的翻訳後修飾の可視化から骨格筋の老化を「見る」

本研究では、イメージング・マス・サイトメトリー手法による多重メージング技術および人工知能による画像解析技術の2つの先駆的技術を活用して骨格筋老化を「見る」（骨格筋老化の特徴を抽出する）ことにより、骨格筋老化の新たな分子プロセスの発見を目指している。研究実施計画に記載した通り、初年度は、老化骨格筋の標本作成ならびに免疫組織化学染色の基礎検討を進めた。具体的には、まず6か月齢、12カ月齢、18カ月齢、24カ月齢のC57BL/6Nマウス（各群3匹）から腓腹筋／足底筋／ヒラメ筋複合筋を摘出し、老齢骨格筋の凍結標本を作成した。次に、イメージングマスサイトメトリーに用いる抗体を選別するために、糖化／老化マーカーとして抗advanced glycation end products（AGEs）抗体、抗carbamyl-lisine抗体、筋線維タイプマーカーとして抗ミオシン重鎖（I, IIa, IIx, IIb）抗体、筋幹細胞マーカーとして抗pax7抗体、血管マーカーとして抗CD31抗体を用いて免疫組織化学染色法の実験条件の確立を進めた。その結果、イメージングマスサイトメトリーに用いることができる抗体の一部選定を終えたほか、実験条件の絞り込みを終えた。

本研究では、イメージング・マス・サイトメトリー手法による多重メージング技術および人工知能による画像解析技術の2つの先駆的技術を活用して骨格筋老化を「見る」（骨格筋老化の特徴を抽出する）ことにより、骨格筋老化の新たな分子プロセスの発見を目指している。研究実施計画に記載した通り、初年度は、老化骨格筋の標本作成ならびに免疫組織化学染色の基礎検討を進めた。具体的には、まず6か月齢、12カ月齢、18カ月齢、24カ月齢のC57BL/6Nマウス（各群3匹）から腓腹筋／足底筋／ヒラメ筋複合筋を摘出し、老齢骨格筋の凍結標本を作成した。次に、イメージングマスサイトメトリーに用いる抗体を選別するために、糖化／老化マーカーとして抗advanced glycation end products（AGEs）抗体、抗carbamyl-lisine抗体、筋線維タイプマーカーとして抗ミオシン重鎖（I, IIa, IIx, IIb）抗体、筋幹細胞マーカーとして抗pax7抗体、血管マーカーとして抗CD31抗体を用いて免疫組織化学染色法の実験条件の確立を進めた。その結果、イメージングマスサイトメトリーに用いることができる抗体の一部選定を終えたほか、実験条件の絞り込みを終えた。