非酵素的翻訳後修飾の可視化から骨格筋の老化を「見る」

通过非酶翻译后修饰的可视化“看到”骨骼肌老化

• 批准号: 22K18413
• 负责人: 江川 達郎
• 金额: $ 16.64万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K18413/
• 关键词: 糖化; 老化; イメージング; IMC; 非酵素的翻訳後修飾; 骨格筋

本研究では、イメージング・マス・サイトメトリー手法による多重メージング技術および人工知能による画像解析技術の2つの先駆的技術を活用して骨格筋老化を「見る」（骨格筋老化の特徴を抽出する）ことにより、骨格筋老化の新たな分子プロセスの発見を目指している。研究実施計画に記載した通り、初年度は、老化骨格筋の標本作成ならびに免疫組織化学染色の基礎検討を進めた。具体的には、まず6か月齢、12カ月齢、18カ月齢、24カ月齢のC57BL/6Nマウス（各群3匹）から腓腹筋／足底筋／ヒラメ筋複合筋を摘出し、老齢骨格筋の凍結標本を作成した。次に、イメージングマスサイトメトリーに用いる抗体を選別するために、糖化／老化マーカーとして抗advanced glycation end products（AGEs）抗体、抗carbamyl-lisine抗体、筋線維タイプマーカーとして抗ミオシン重鎖（I, IIa, IIx, IIb）抗体、筋幹細胞マーカーとして抗pax7抗体、血管マーカーとして抗CD31抗体を用いて免疫組織化学染色法の実験条件の確立を進めた。その結果、イメージングマスサイトメトリーに用いることができる抗体の一部選定を終えたほか、実験条件の絞り込みを終えた。

This study aims to explore the application of two advanced technologies in the development of new molecular mechanisms for bone aging, namely, multi-resolution technology and artificial intelligence technology. The study was carried out to document the progress of the study on the basis of immunohistochemical staining of aged bone and tendon tissues. The specific C57BL/6N (3 for each group) was extracted from 6, 12, 18 and 24 months ago, and the frozen tendons of the old ribs were prepared. Antibodies against advanced glycation end products (AGEs), anti-carbamyl-lisine antibodies, anti-pax-7 antibodies, anti-CD31 antibodies, tendon stem cells, and anti-CD31 antibodies were used to establish the conditions for the development of immunohistochemical staining. The result of the test is that the antibody is selected according to the test conditions.

项目成果

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