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IL-6による分化PC12細胞の保護機能の解明

阐明IL-6对分化PC12细胞的保护功能

基本信息

批准号：
22K11315
负责人：
菊池真
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K11315/
关键词：
PC12 gp-130 STAT3 IL-6 IK-6 保護作用

项目摘要

令和４年度は、Nerve Growth Factor （NGF)により分化したPC12細胞に対して、IL-6受容体であるgp-130および、細胞内シグナルタンパクである、STAT3およびリン酸化STAT3の発現を観察した。当初、予定していた通り、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに３日間培養したものを、試料とし、Western blotting法に用いた。その結果、STAT３の発現は観察されたが、gp-130の発現および、STAT3のリン酸化は、ほぼ観察されなかった。その後、培養期間を延長し、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに10日間培養したものを資料に用いた結果、十分なgp-130の発現を観察することができた。同時に、IL-6による刺激も検討したが、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに３日間培養した試料では、STAT3の十分なリン酸化を認めることができなかった。これらのことから、IL-6の影響を観察するためには、受容体であるgp-130の十分な発現が重要であると考えた。現在、IL-6の主たる受容体であるgp-130がPC12継代後どの時点で最大に達するのかを検討するため、PC12細胞の継代およびNGF添加後、３日間、７日間、１０日間培養したものを試料とし、どの時点でgp-130の発現が最大に達するのかを検討中である。少なくとも、継代・分化誘導後、早期のPC12細胞ではIL-6暴露によるSTAT3のリン酸化は誘導することはできないことが明らかとなった。

In order to investigate the expression of NGF in PC12 cells, IL-6 receptor gp-130, STAT3 and STAT3 in intracellular cells in vitro. At the beginning, the method of NGF was used in the first generation of PC12, and the method of Western blotting was used in the third generation. Results: STAT3 detection, gp-130 detection, STAT3 detection, and detection. After the culture period was extended, NGF was added to the culture medium 1 day later, and the expression of gp-130 was observed. At the same time, IL-6 stimulation test, PC12 generation 1 day later NGF addition, STAT3 day culture test, 10 minutes acidification test The influence of IL-6 on the development of the receptor gp-130 is important. Now, IL-6 host cell receptor can reach the maximum expression of gp-130 at the time point after PC12 generation, PC12 cell culture can reach the maximum expression at the time point after NGF addition, 3 days, 7 days and 10 days culture. However, it is clear that after induction of differentiation, STAT3 phosphorylation is induced in early PC12 cells due to IL-6 exposure.