IL-6による分化PC12細胞の保護機能の解明

令和４年度は、Nerve Growth Factor （NGF)により分化したPC12細胞に対して、IL-6受容体であるgp-130および、細胞内シグナルタンパクである、STAT3およびリン酸化STAT3の発現を観察した。当初、予定していた通り、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに３日間培養したものを、試料とし、Western blotting法に用いた。その結果、STAT３の発現は観察されたが、gp-130の発現および、STAT3のリン酸化は、ほぼ観察されなかった。その後、培養期間を延長し、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに10日間培養したものを資料に用いた結果、十分なgp-130の発現を観察することができた。同時に、IL-6による刺激も検討したが、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに３日間培養した試料では、STAT3の十分なリン酸化を認めることができなかった。これらのことから、IL-6の影響を観察するためには、受容体であるgp-130の十分な発現が重要であると考えた。現在、IL-6の主たる受容体であるgp-130がPC12継代後どの時点で最大に達するのかを検討するため、PC12細胞の継代およびNGF添加後、３日間、７日間、１０日間培養したものを試料とし、どの時点でgp-130の発現が最大に達するのかを検討中である。少なくとも、継代・分化誘導後、早期のPC12細胞ではIL-6暴露によるSTAT3のリン酸化は誘導することはできないことが明らかとなった。

令和４年度は、Nerve Growth Factor （NGF)により分化したPC12細胞に対して、IL-6受容体であるgp-130および、細胞内シグナルタンパクである、STAT3およびリン酸化STAT3の発現を観察した。当初、予定していた通り、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに３日間培養したものを、試料とし、Western blotting法に用いた。その結果、STAT３の発現は観察されたが、gp-130の発現および、STAT3のリン酸化は、ほぼ観察されなかった。その後、培養期間を延長し、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに10日間培養したものを資料に用いた結果、十分なgp-130の発現を観察することができた。同時に、IL-6による刺激も検討したが、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに３日間培養した試料では、STAT3の十分なリン酸化を認めることができなかった。これらのことから、IL-6の影響を観察するためには、受容体であるgp-130の十分な発現が重要であると考えた。現在、IL-6の主たる受容体であるgp-130がPC12継代後どの時点で最大に達するのかを検討するため、PC12細胞の継代およびNGF添加後、３日間、７日間、１０日間培養したものを試料とし、どの時点でgp-130の発現が最大に達するのかを検討中である。少なくとも、継代・分化誘導後、早期のPC12細胞ではIL-6暴露によるSTAT3のリン酸化は誘導することはできないことが明らかとなった。