細胞内情報伝達の生理機能解析と情報分子の可視化

细胞内信息传递的生理分析和信息分子的可视化

• 批准号: 09273101
• 负责人: 飯野 正光
• 金额: $ 41.86万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09273101/
• 关键词: カルシウム; イノシトール三燐酸; 膵臓β細胞; 分泌; 受精; 蛍光カルシウム指示薬; cAMP; GFP; 血管平滑筋; 転写制御

本研究班は、設計分子の作用を解析するため、収縮、分泌、発生、免疫、転写調節と極めて重要な生体機能を制御するCa^<2+>シグナル機構研究を推進し以下の成果を得た。ca^<2+>シグナルパターンとIP_3受容体サブタイプの発現パターンの関係を明らかにするため、遺伝子工学手法を援用して単一のIP_3受容体サブタイプのみを発現する細胞系を作成し、各サブタイプの機能を比較した。これによりサブタイプ間には大きな機能的相違が存在し、Ca^<2+>シグナルパターンの違いを形成するのに極めて重要であることを示した。膵臓β細胞では、インスリン顆粒の開口放出にはカルシウム濃度上昇だけでなくAキナーゼによるりん酸化が必要で、それが細胞内ATP濃度に依存的であることを見出した。これがβ細胞のグルコース応答に関与する可能性を示した。受精・初期発生の引き金になる卵細胞内Ca^<2+>濃度上昇を誘発する精子因子の解析を行った.精子抽出物がIP_3受容体を介するCa^<2+>遊離によってCa^<2+>波およびCa^<2+>オシレーションを誘発することを明らかにし、精子細胞質蛋白質の精製に着手した。蛍光波長の異なる2つのGreen Fluorescent Protein(GFP)の蛍光共鳴エネルギー移動が蛋白質の構造変化によって変化し得ることを利用して、細胞内cAMP濃度やCa^<2+>濃度変化のモニターを可能とするような蛋白質の作製に成功した。

In this research class, we designed molecular tools to analyze the effects of drugs, drugs, secretion, immunity, immunity, and so on. The important biological mechanisms of this class are able to control the production of calcium ^ & lt;2+> and promote the following results. The CA^ & lt;2+> system is sensitive to IP _ 3 recipients. This is not the only way to improve the performance of the IP _ 3 recipients. In this way, the IP _ 3 recipients' cell lines are established, and the mechanical properties of the cells are compared. It is important to know that there is a correlation between the mechanical properties of large enterprises, and that Ca ^ & lt;2+> has a significant impact on the overall performance. The temperature of the cell and the opening of the cell is very high, and the temperature is very high. The concentration of ATP in the cell is dependent on the temperature of the cell and the temperature of the cell. Please tell me that the possibility is different from the answer. In the early stage of fertilization, the sperm factor was analyzed and analyzed on the intracellular Ca ^ & lt;2+> level of the golden egg. Sperm extract: IP_3 receptor (CA ^ & lt;2+>) is isolated from sperm, Ca ^ & lt;2+> wave, Ca ^ & lt;2+> wave, Ca ^, lt;2+>, sperm, cell protein, sperm protein. The photoluminescence Green Fluorescent Protein (GFP) photoluminescence assay showed that the protein transfer assay was successful. The results showed that it was possible to detect the success of the protein assay by using the molecular weight, intracellular cAMP concentration, Ca ^ & lt;2+> spectroscopy.

项目成果

Eto,K.: "Role of NADH shuttle system in glucose-induced activation of mitochondrial metabolism and insulin secretion." Science. 283. 981-985 (1999)

Eto,K.：“NADH 穿梭系统在葡萄糖诱导的线粒体代谢激活和胰岛素分泌中的作用。”

Nishi,M.: "Mitsugumin23,a novel transmembrane protein on endoplasmic reticulum and nuclear membrane." FEBS Lett.432. 191-196 (1998)

Nishi,M.：“Mitsugumin23，一种在内质网和核膜上的新型跨膜蛋白。”

Hashimot,A.: "Inhibitory modulation of B cell receptor-mediated Ca^<2+> mobilization by SH2 domain containing inositol 5′-phosphatase(SHIP)." J.Biol.Chem.433(in press). (1999)

Hashimot, A.：“含有肌醇 5-磷酸酶 (SHIP) 的 SH2 结构域对 B 细胞受体介导的 Ca^2+ 动员的抑制性调节。J.Biol.Chem.433（出版中）”。

Kasai,Y.: "Endothelium-dependent frequency modulation of Ca^<2+> signaling in individual vascular smooth muscle cells of the rat." J.Physiol.504. 349-357 (1997)

Kasai,Y.：“大鼠个体血管平滑肌细胞中 Ca^2 信号的内皮依赖性频率调节。”

Sjoedin,L.: "Cytoplasmic Ca^<2+> gradients evoked by acetylcholine and peptides in Pancreatic acinar cells of the guinea pig." Pflugers Arch.433. 397-402 (1997)

Sjoedin,L.：“豚鼠胰腺腺泡细胞中乙酰胆碱和肽引起的细胞质 Ca^2 梯度。”