偶蹄類フェロモン分子群の同定と受容メカニズムの解明

脊椎動物において、７回膜貫通型タンパク質である鋤鼻１型受容体（vomeronasal receptors; V1Rs）は遺伝子ファミリーを形成しており、フェロモンやカイロモンのような社会シグナルの受容に関与すると考えられている。従って、様々な動物種のV1Rsのリガンド分子の同定は、それらのフェロモンやカイロモンの同定につながることが予想される。本研究ではV1Rsを培養細胞に機能発現させるアッセイ系を確立することで、様々な種のV1Rsのリガンド探索を目的とした。鋤鼻神経細胞では、V1RsはGαiにカップリングし、Gβγを介してPLCβを活性化すると考えらえているが、このシグナル伝達をHEK293細胞で再現したカルシウムイメージング系を確立することができた。また、マウスを用いたバイオアッセイで、雄マウス尿からHEK293細胞で非特異的な応答を引き起こさないV1Rリガンドの精製条件を確立し、応答するV1Rクレードまでは同定できた。新規のV1Rsリガンド分子の同定には至っていないものの、今後はこれらの手法を用いることで、各種V1Rやその他のGαiカップリングするオーファンGPCRのリガンド同定への応用が期待される。

脊椎動物において、７回膜貫通型タンパク質である鋤鼻１型受容体（vomeronasal receptors; V1Rs）は遺伝子ファミリーを形成しており、フェロモンやカイロモンのような社会シグナルの受容に関与すると考えられている。従って、様々な動物種のV1Rsのリガンド分子の同定は、それらのフェロモンやカイロモンの同定につながることが予想される。本研究ではV1Rsを培養細胞に機能発現させるアッセイ系を確立することで、様々な種のV1Rsのリガンド探索を目的とした。鋤鼻神経細胞では、V1RsはGαiにカップリングし、Gβγを介してPLCβを活性化すると考えらえているが、このシグナル伝達をHEK293細胞で再現したカルシウムイメージング系を確立することができた。また、マウスを用いたバイオアッセイで、雄マウス尿からHEK293細胞で非特異的な応答を引き起こさないV1Rリガンドの精製条件を確立し、応答するV1Rクレードまでは同定できた。新規のV1Rsリガンド分子の同定には至っていないものの、今後はこれらの手法を用いることで、各種V1Rやその他のGαiカップリングするオーファンGPCRのリガンド同定への応用が期待される。