ＦＯＸＯ３ａによる抗老化実現の分子基盤の解明とアンチエイジング食品創製への応用

阐明FOXO3a抗衰老的分子基础及其在抗衰老食品开发中的应用

• 批准号: 13J04465
• 负责人: 山下 俊太郎
• 金额: $ 1.32万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J04465/
• 关键词: アンチエイジング; 機能性食品; 細胞老化; FOXO3a; テロメラーゼ; hTERT; c-MYC

これまでの研究からFOXO3aによるテロメラーゼ制御機構が明らかになり、それに伴う抗細胞老化効果についても明らかにすることができた。そこで今回我々は新たに発見した抗細胞老化因子としてのFOXO3a及び既にこれまでの研究から抗細胞老化因子として明らかになっているSIRT1をターゲットとした新規アンチエイジング因子の探索系の構築及びその機能性の解析を行うことを目的とした。i)抗細胞老化因子活性化食品の探索系の構築：SIRT1プロモーターにより制御されるEGFP発現ベクター及びFOXO3aの結合エレメント（DBE）により制御されるYFP発現ベクターの構築を行った。これらのベクターをターゲット細胞へ導入し、食品をはじめとした因子を添加後、EGFP及びYFP蛍光強度の変化を検証することでアンチエイジング食品・因子の探索を行う。蛍光強度の検証については、既に研究室に導入済みの全自動細胞機能解析装置イメージングサイトメーターを用いることで行う。ii)SIRT1活性化因子の探索及び機能性の検証：抗細胞老化因子活性化食品の探索を行う上で、まず我々は皮膚老化に着目し、皮膚細胞への紫外線照射に対するSIRT1のバリア機能について検証することとした。上記ベクターを皮膚上皮細胞であるHaCaT細胞に導入することでHaCaT細胞へ食品サンプルを添加した際にEGFP蛍光強度の変化を検証することでSIRT1活性化食品の探索を行うこととした。今回食品サンプルに関してはネパール産キノコの乾燥粉末を用いた。その結果、一つのサンプルについてSIRT1を有意に活性化させることが明らかとなった。また細胞老化マーカーとして知られるSA-β-Gal、γH2AX、p16、p21、p-p38に対する抑制効果についても検証した結果、今回見出したサンプルがそれぞれに対して抑制効果を持つことも明らかにすることが出来た。

こ れ ま で の research か ら FOXO3a に よ る テ ロ メ ラ ー ゼ system of the royal institution が Ming ら か に な り, そ れ に with う cell aging resistance unseen fruit に つ い て も Ming ら か に す る こ と が で き た. そ こ で today back to my 々 は new た に 発 see し た cell aging resistance factor と し て の FOXO3a and び both に こ れ ま で の research か ら cell aging resistance factor と し て Ming ら か に な っ て い る SIRT1 を タ ー ゲ ッ ト と し た new rules ア ン チ エ イ ジ ン グ factor の exploration is の construct and び そ の functional line analytical を の う こ と を purpose と し た. I) cell aging resistance factor activeness food の explore の construct: SIRT1 プ ロ モ ー タ ー に よ り suppression さ れ る EGFP 発 now ベ ク タ ー and び FOXO3a の combining エ レ メ ン ト (DBE) に よ り suppression さ れ る YFP 発 now ベ ク タ ー の line build を っ た. こ れ ら の ベ ク タ ー を タ ー ゲ ッ ト cells へ import し, food を は じ め と し た factor を, EGFP and after adding び YFP 蛍 light intensity の variations change を 検 card す る こ と で ア ン チ エ イ ジ ン グ food line の explore を う, factors. 蛍 light intensity の 検 card に つ い て は, both に laboratory に import 済 み の automatic cell function analytical device イ メ ー ジ ン グ サ イ ト メ ー タ ー を with い る こ と う で line. Ii) SIRT1 activation factor の explore and び functional の 検 : activation cell aging resistance factor on food line の explore を う で, ま ず I 々 は skin ageing に mesh し, skin cell へ の ultraviolet irradiation に す seaborne る SIRT1 の バ リ ア function に つ い て 検 card す る こ と と し た. Written ベ ク タ ー を skin epithelial cells で あ る HaCaT cells に import す る こ と で HaCaT cells へ food サ ン プ ル を add し た interstate に EGFP 蛍 light intensity の variations change を 検 card す る こ と で SIRT1 activation food の exploration line を う こ と と し た. This time, the food サ プ プ に に に に に に is related to the <s:1> て ネパ ネパ ネパ <e:1> キノコ キノコ dry powder を produced by <s:1> た た. そ の results, a つ の サ ン プ ル に つ い て SIRT1 を intentionally に activeness さ せ る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た cell aging マ ー カ ー と し て know ら れ る SA - beta - Gal, gamma H2AX, p16, p21, p - p38 lightning に す seaborne る inhibition of unseen fruit に つ い て も 検 card し た results, today toodles し た サ ン プ ル が そ れ ぞ れ に し seaborne て inhibition of unseen fruit を hold つ こ と も Ming ら か に す る こ と が た.

项目成果

長寿遺伝子SIRT1による皮膚老化抑制

长寿基因SIRT1抑制皮肤老化

• 发表时间: 2013
• 作者: 山下俊太郎;黒田真衣;深見克哉;片倉喜範
• 通讯作者: 片倉喜範

FOXO3a potentiates hTERT gene expression by activating c-MYC and extends the replicative life-span of human fibroblast.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0101864
• 发表时间: 2014
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Yamashita S;Ogawa K;Ikei T;Fujiki T;Katakura Y
• 通讯作者: Katakura Y

PKC-δにより誘導されるhTERT 転写抑制の分子メカニズム

PKC-δ诱导hTERT转录抑制的分子机制

• 发表时间: 2013
• 作者: 山下俊太郎;片倉喜範
• 通讯作者: 片倉喜範

温度応答性プロテインAによる抗体の精製

使用温度响应蛋白 A 纯化抗体

• 发表时间: 2013
• 作者: 小熊一郎;石川ルミ子;小澤啓子;丸本朝清;佐藤聡;山下俊太郎;片倉喜範
• 通讯作者: 片倉喜範

In vitro neuroprotective activities of compounds from Angelica shikokiana Makino.

• DOI: 10.3390/molecules20034813
• 发表时间: 2015-03-16
• 期刊: Molecules (Basel, Switzerland)
• 作者: Mira A;Yamashita S;Katakura Y;Shimizu K
• 通讯作者: Shimizu K