遺伝子改変マウスを用いたウイルス感染時の新規自然免疫機構の解明

使用转基因小鼠阐明病毒感染过程中的新型先天免疫机制

• 批准号: 13J01978
• 负责人: 岡本 将明
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J01978/
• 关键词: 自然免疫; ウイルス; HCV; RLR; TLR３; 脱分化; RNAセンサー; TICAM-1; IL17; 炎症; 免疫疾患; 感染; ウイルス感染; IPS-1; III型IFN; 樹状細胞; 肝細胞

RNAウイルスであるHCVの感染における病態の進行過程では、肝星細胞の筋繊線芽細胞への分化転換により組織の繊維化が起こり、肝硬変に進展する。また、肝発ガンに於いては、肝実質細胞のEMTから癌幹細胞が生じることが示唆されており、HCV感染の病態進行では、細胞の脱分化、分化様のイベントが発生している。当研究室では、ウイルスの二本鎖RNAに対する応答解析に用いられるpolyI:Cで細胞質内の自然免疫経路RLRを刺激することで、ヒト繊維芽細胞 BJ細胞に於いて、脱分化マーカーであるOCT3/4を含む山中因子が発現上昇する知見を得ていた。そこで、今年度はHCV感染時に於ける細胞の脱分化に、自然免疫によるウイルス核酸認識経路が関与し得るかを検討した。RLRであるRIG－Iに認識されるHCV RNAの3'UTRをBJ細胞質内に投与したところ、polyI:C同様にOCT3/4のmRNAの発現が上昇することがわかった。この発現は蛍光顕微鏡による観察により、タンパク質レベルでも確認された。一方で、二本鎖RNAセンサーであるTLR3経路を活性化させた場合には、OCT3/4の発現上昇は観察されなかった。また、OCT3/4が発現する際、IFN-betaの著しい発現上昇が同時に見られるため、siRNAによるKDや阻害剤によりIFN経路がOCT3/4発現に関与するか検討し、OCT3/4の発現上昇はIFN経路に非依存的であることを示唆する知見が得られた。さらに、肝星細胞株を用いて、RLRまたはTLR3を活性化することで、筋繊維芽細胞への分化転換が生じるか、あるいは促進されるかをコラーゲン、転写因子の発現によりに検討したが、関与は認められなかった。

The pathological process of HCV infection can be seen in RNA molecules, the differentiation and transformation of hepatic stellate cells and tendon bud cells, the development of tissue maintenance, and the progression of liver cirrhosis. In addition, liver development, EMT of liver stromal cells, development of cancer stem cells, development of HCV infection, pathological progression of HCV infection, cell dedifferentiation and differentiation, and development of cancer stem cells. When the laboratory analyzed the response to the two essential RNA responses, it was found that polyI:C stimulated the natural immune pathway RLR in the cytoplasm of BJ cells, and OCT3/4 increased in the middle and dedifferentiation of BJ cells. This year, HCV infection is associated with cell dedifferentiation, natural immunity, and nucleic acid recognition pathways. The expression of OCT3/4 mRNA in the cytoplasm of BJ cells was increased by RLR and RIG-I recognition. This discovery is confirmed by the optical microscope. One side, two side lock RNA, three side lock RNA, three side When OCT3/4 occurs, IFN-beta occurs simultaneously, siRNAs occur independently of KD and IFN pathway, and OCT3/4 occurs independently of IFN pathway. In addition, the activation of TLR3 in hepatic stellate cell lines promotes the differentiation and development of vascular cells.

项目成果

HCV RNAに対するIPS-1依存的なIII型IFN産生機構の解明

阐明针对 HCV RNA 的 IPS-1 依赖性 III 型 IFN 产生机制

• 发表时间: 2014
• 作者: Mizusawa K;Kawashima Y;Sunuma T;Hamamoto A;Kobayashi Y;Kodera Y;Saito Y;Takahashi A.;岡本将明 押海裕之 松本美佐子 瀬谷司
• 通讯作者: 岡本将明 押海裕之 松本美佐子 瀬谷司

IPS-1 is essential for type III interferon production by hepatocytes and Dendritic cells in response to cytoplamic hepatitis C virus RNA.

IPS-1 对于肝细胞和树突状细胞响应细胞质丙型肝炎病毒 RNA 产生 III 型干扰素至关重要。

• 发表时间: 2013
• 作者: Masaaki Okamoto;et al.
• 通讯作者: et al.