MOLECULAR BIOLOGY OF P CARINII GP120

P CarINII GP120 的分子生物学

基本信息

  • 批准号:
    2225708
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 21.88万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    1992
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    1992-08-01 至 1996-04-21
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Pneumonia caused by the opportunistic pathogen Pneumocystis carinii is a primary cause of mortality in patients with acquired immunodeficiency syndrome and in other immunocompromised hosts. The long range goal of the proposed study is to identify antigens of P. carinii that are involved in acquired resistance to infection. Patients or infected animals that have recovered from P. carinii pneumonia (PCP) demonstrate an immune response to an abundant, immunodominant surface glycoprotein of P. carinii, which in the ferret model of PCP has an Mr of 120 kDa (gpl2O). This and other data indicate that the surface glycoprotein is important in the host-P. carinii interaction. The immediate focus of this proposal is to perform a molecular biological analysis of ferret P. carinii gp 120. There are three main aspects to the proposed study. Several recombinant cDNA clones, each encoding a portion of the cDNA for ferret P. carinii gpl2O, have been isolated using specific antibodies against native ferret P. carinii gpl2O. Nucleotide sequence analysis suggested that the cDNA clone's correspond to transcripts encoding at least two different isoforms of gpl2O. These results support the hypothesis that genetic polymorphism of ferret P. carinii gpl2O results in variation of the protein core of the molecule. To test this hypothesis, the full-length cDNAs corresponding to the predicted ferret P. carinii gpl2O isoforms will be cloned and sequenced. Analysis of the nucleotide sequences will establish the inter-relationship of the cDNA clones. Recent analyses of the karyotypes of rat and human P. carinii established that genetic variation exists in the P. carinii genome at the chromosomal level. To investigate the potential for heterogeneity in the chromosomal organization of the gp120 gene, the electrophoretic karyotype of ferret P. carinii will be determined by pulsed-field gel electrophoresis and the gp l2O-specific chromosomes will be mapped by Southern hybridization. After expression in eukaryotic and prokaryotic expression systems, the antigenic relatedness of glycosylated and non-glycosylated recombinant gpl2O to native gpl2O will be compared using immunological methods. Molecular characterization of ferret P. carinii gp 120 will be essential to understand the basis of its interaction with the host immune system. The data obtained from the proposed studies will contribute to the design of diagnostic reagents and immunotherapy for PCP.
由机会性病原体卡氏肺孢子虫引起的肺炎是一种 获得性免疫缺陷患者死亡的主要原因 综合征和其他免疫功能低下的宿主。 长期目标是 这项研究的目的是鉴定卡氏肺孢子虫的抗原, 与获得性抗感染有关。 患者或感染者 从卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)中恢复的动物证明 免疫反应的丰富,免疫显性表面糖蛋白, P. carinii,其在PCP的雪貂模型中具有120 kDa的Mr (gpl20)。 这一数据和其他数据表明,表面糖蛋白是 在宿主-卡氏疟原虫相互作用中起重要作用。 的直接重点 本发明的目的是对雪貂P进行分子生物学分析。 第120章. 拟议的研究有三个主要方面。 几个重组cDNA克隆,每一个都编码一部分cDNA, 雪貂卡氏肺孢子虫gp 120,已经使用特异性抗体分离 针对本地雪貂卡氏肺吸虫gp 120。 核苷酸序列分析 这表明cDNA克隆对应于转录本, 至少两种不同的gp 120同种型。 这些结果支持这一 假设雪貂卡氏肺孢子虫gp 120遗传多态性导致 在分子的蛋白质核心的变异中。 为了验证这一 假设,全长cDNA对应于预测的雪貂 P.卡氏gp 120同种型将被克隆和测序。 分析 核苷酸序列将建立cDNA的相互关系 克隆 最近对大鼠和人类卡氏肺吸虫核型的分析建立了 卡氏肺吸虫基因组中存在遗传变异, 水平 为了研究染色体中异质性的可能性, 雪貂gp 120基因的组织、电泳核型 P.卡里尼将是 通过脉冲场凝胶电泳和gp 12 O特异性 将通过Southern杂交绘制染色体图谱。 在真核和原核表达系统中表达后, 糖基化和非糖基化重组体的抗原相关性 将使用免疫学方法比较gp 12 O与天然gp 12 O。 雪貂卡氏肺孢子虫gp 120的分子特征将是必不可少的 以了解其与宿主免疫系统相互作用的基础。 从拟议研究中获得的数据将有助于设计 诊断试剂和免疫疗法的能力

项目成果

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    $ 21.88万
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    $ 21.88万
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    8532661
  • 财政年份:
    2011
  • 资助金额:
    $ 21.88万
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