PHOSPHORUS METABOLISM OF DICTYOSTELIUM DISCOIDEUM

盘基网柄菌的磷代谢

基本信息

  • 批准号:
    3438404
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 8.16万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    1985
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    1985-11-06 至 1988-07-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

The overall objective of the proposed research is to identify and quantitatively analyze for all soluble phosphorus-containing metabolites in Dictyostelium discoideum. This organism is very widely used by developmental biologists to study the process of differentiation. In a 24 hr period under starvation conditions single-celled amoebae aggregate to form multicellular masses which eventually form two distinct cell types - stalk cells and spore cells. A spore, under correct conditions of temperature and humidity will release a single amoeba to start the cycle anew. With no exogenous nutrients entering the developing cells, D. discoideum is a closed system amenable to quantitative analysis of its metabolites. This we shall do for all soluble phosphorus-containing substances by examining perchloric acid extracts of cells at each stage of development using 31P nmr spectroscopy. Preliminary experiments disclose that about 40% of the soluble phosphorus-containing metabolites appear as a peak at 0.5 ppm in the 31P nmr spectrum. Purification by ion exchange chromatography, electrophoresis, and subsequent enzymatic degradation indicate this material is a group of small polynucleotides. These preliminary findings will be corroborated and the fate of this material will be determined at each stage of development using 31P nmr. Southern hybridization with D. discoideum DNA should show where this material comes from.
拟议研究的总体目标是确定和 定量分析所有可溶性含磷代谢产物, 盘状网柄藓 这种生物体被发育生物学家广泛用于研究 分化的过程。 在饥饿条件下的24小时内 单细胞阿米巴聚集形成多细胞团, 最终形成两种不同的细胞类型柄细胞和孢子细胞。 一 孢子,在正确的温度和湿度条件下, 一只变形虫开始新的循环 不含外源营养 进入发育细胞D.盘状突是一个封闭的系统, 其代谢物的定量分析。 我们将为所有可溶的 含磷物质的高氯酸提取物, 细胞在每个阶段的发展,使用31 P核磁共振光谱。 初步实验表明,约40%的可溶性 含磷代谢物在31P中以0.5ppm处的峰出现 NMR谱。 通过离子交换色谱纯化, 电泳和随后的酶降解表明这一点 材料是一组小的多核苷酸。 这些初步结果 将得到证实,这些材料的命运将在 每个阶段的发展,使用31 P核磁共振。 Southern杂交结果表明,D. 盘状突DNA应该能显示这些物质的来源。

项目成果

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