PROTEIN SYNTHESIS DURING ONCOGENIC TRANSFORMATION

致癌转化过程中的蛋白质合成

基本信息

项目摘要

Studies have continued on the role of tropomyosin suppression in neoplastic transformation. To ascertain which, if any, components of the transformed phenotype are directly caused by suppression of tropomyosin synthesis, specific inhibition of translation of tropomyosin mRNA in intact cells was attempted by constructing an anti-sense producting vector and introducing it into NIH 3T3 cells. Successful transfectants were selected by resistance to the antibiotic, G418, and these have now been cloned. By translation of mRNA in cell-free systems and by northern blot analysis, it was established that tropomyosin suppression results from reduced levels of specific tropomyosin mRNAs. To improve the specificity of molecular probes for mouse cell tropomyosin mRNA and DNA, and to obtain more effective antisense sequences, a cDNA library derived from NIH 3T3 mRNA was produced in the lambda-gt11 expression vector. This library was screened with the TM4 cDNA probe and with anti-tropomyosin antiserum to select specific cDNA clones for the various species of tropomyosin. Thirty TM4-positive plaques were identified and purified.
关于原肌球蛋白抑制在肿瘤发生中的作用的研究仍在继续。 转型 为了确定哪些(如果有的话), 表型直接由原肌球蛋白合成的抑制引起, 特异性抑制完整细胞中原肌球蛋白mRNA的翻译, 尝试通过构建反义生产载体并引入 NIH 3T3细胞。 成功的转染子是通过 对抗生素G418的抗药性,现在已经克隆出来了。 通过 在无细胞系统中mRNA的翻译,并通过北方印迹分析, 原肌球蛋白抑制是由于 特异性原肌球蛋白mRNA。 为了提高分子探针的特异性 小鼠细胞原肌球蛋白mRNA和DNA,并获得更有效的 反义序列,从NIH 3T3 mRNA中产生cDNA文库 表达载体中。 该文库用 TM4 cDNA探针并用抗原肌球蛋白抗血清筛选特异性cDNA 各种原肌球蛋白的克隆。 30个TM4阳性斑块 鉴定并纯化。

项目成果

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