LONG DISTANCE CONTROL OF LIVER GENE EXPRESSION
肝脏基因表达的远距离控制
基本信息
- 批准号:6207195
- 负责人:
- 金额:$ 28.81万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:1996
- 资助国家:美国
- 起止时间:1996-07-01 至 2002-11-30
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:DNA footprinting albumins alpha fetoprotein gel mobility shift assay gene deletion mutation gene expression genetic enhancer element genetic library genetic mapping genetic models genetic promoter element genetic regulation genetic regulatory element liver cells nuclear matrix oligonucleotides plasmids recombinant DNA restriction endonucleases transcription factor transfection
项目摘要
DESCRIPTION: Albumin and alpha-fetoprotein (AFP), adjacent members of a
gene family, are critical markers of developmental and neoplastic phenotypes
in hepatocytes. Studies suggest that the two genes are coordinately
regulated through common transcription controls. The AFP gene is regulated
by long-distance coupling mediated by a novel transcription factor, PCF; the
albumin gene shows similar long-distance stimulation, but not mediated by
PCF. The goal of this study is to characterize the unique coupling elements
that regulate the albumin-AFP locus and to demonstrate that these elements
are integral components of the local chromosomal organization. Toward this
goal, Aim 1 experiments will define the element(s) between -170 and -84 in
the albumin promoter which is responsive to the enhancers within the AFP
gene. Deletion and mutation studies will localize significant elements,
oligonucleotide gel shift experiments will characterize the essential
transcription factors, and new factors defined by this approach will be
cloned from a lambda gt expression library. In Aim 2, studies are primarily
focused upon identifying whether Matrix Association Regions (MARs), sites of
chromosomal attachment to the nuclear scaffold, are present within the
region from -15 of the albumin gene to +10 of the AFP gene. Aim 3
experiments will focus on studying how the entire albumin/AFP locus
functions as a single unit in stably transfected cells with the control
elements placed at correct genomic locations. Plasmids will be generated to
establish a second model system for the study of long-distance gene
regulation within a chromosomal locus with properties very different from
the beta globin locus.
描述:白蛋白和甲胎蛋白(AFP),邻近的成员
基因家族是发育和肿瘤表型的重要标志
在肝细胞中。研究表明,这两个基因是协调的。
通过共同的转录调控来调节。甲胎蛋白基因受调控
通过一种新的转录因子PCF介导的长距离偶联;
白蛋白基因表现出类似的远距离刺激,但不是由
PCF。这项研究的目标是表征独特的耦合元件
调节白蛋白-甲胎蛋白基因座并证明这些元素
是当地染色体组织的组成部分。朝向这个方向
目标,目标1实验将定义元素(S)在-170in和-84in之间
对甲胎蛋白内的增强子有反应的白蛋白启动子
吉恩。缺失和突变研究将定位重要的元素,
寡核苷酸凝胶移动实验将表征必要的
转录因子,以及由这种方法定义的新因子将是
克隆自lambda GT表达文库。在目标2中,研究主要是
重点是确定矩阵协会区域(MARS)、
染色体附着在核支架上,存在于
白蛋白基因-15到甲胎蛋白基因+10的区域。目标3
实验将集中在研究整个白蛋白/甲胎蛋白如何定位
在具有对照的稳定转染细胞中作为单个单位发挥作用
将元素放置在正确的基因组位置。将产生的质粒会
建立远程基因研究的第二个模式系统
染色体基因座内的调节,其特性与
贝塔珠蛋白基因。
项目成果
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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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