PATHOGENESIS AND PREVENTION OF TYPE I DIABETES IN THE NOD MOUSE AND MAN

NOD 小鼠和人 I 型糖尿病的发病机制和预防

• 批准号: 6320839
• 负责人: HUGH O MCDEVITT
• 金额: $ 13.94万
• 依托单位: STANFORD UNIVERSITY
• 依托单位国家: 美国
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 美国
• 起止时间: 1999-12-01 至 2000-11-30
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://reporter.nih.gov/project-details/6320839
• 关键词: MHC class II antigen; NOD mouse; autoantibody; disease /disorder etiology; genetically modified animals; glutamate dehydrogenase; insulin; insulin dependent diabetes mellitus; pancreatic islets

Susceptibility to juvenile onset insulin dependent diabetes mellitus (IDDM) is linked to two HLA DQ alleles--HLA DQ8 and HLA DQ2. Because of the great difficulty in isolating DQ restricted human T cell clones, information on the specificity of the DQ restricted T cell response to islet cell antigens is non-existent. Susceptible HLA DQ alleles lack aspartic acid in DQB position 57. (DQ8) exhibits striking differences in binding a number of peptide binding in comparison to DQ9, which is DQbeta57Asp+, and otherwise identical to DQ8. T/H2 CD4 + T/H1 T cells cause islet beta cell destruction. Islet antigen specific T/h2 cells are protective. One mechanism for DQ associated susceptibility is that susceptible alleles bind and present a distinct subset of peptides which induce a predominant T/H1 response. Resistant alleles binding other islet antigen peptides which induce a T/h2 responses. The proposed experiments will test whether susceptible and resistant alleles bind and present different subsets of peptides. This will be done by the production of transgenic mice expressing the relevant HLA DQ alleles, as well as human CD4, in the presence and absence of murine CD4. HLA DQ8.huCD4 transgenic mice at backcross 5 to NOD have been observed develop type I diabetes. Transgenic mice and non-transgenic littermate controls will be monitored for the spontaneous development of auto- antibodies to islet cell antigens and HLA DQ restricted T cell responses to GA65 and pre pro-insulin. Untreated transgenic mice and transgenic mice immunized with recombinant human GD65 and pre pro-insulin will be used to assess the peptides presented by DQ8, DQ7 and DQ6 to T cells. This will be done by using lymph node and spleen T cells from these mice to the murine T cell hybridoma, DW5147. The resulting hybridomas will be analyzed for HLA DQ restriction and peptide specificity. Finally, those peptide epitopes presented by HLA DQ8 will be used to detect HLA DQ restricted responses in pre-diabetic and recent onset diabetic patients.

青少年发病的胰岛素依赖型糖尿病的易感性 (IDDM) 与两个 HLA DQ 等位基因——HLA DQ8 和 HLA DQ2 相关。由于 分离 DQ 限制性人类 T 细胞克隆非常困难， 有关 DQ 限制性 T 细胞响应特异性的信息 胰岛细胞抗原不存在。 易感 HLA DQ 等位基因在 DQB 位点 57 处缺乏天冬氨酸。(DQ8) 在结合许多肽时表现出显着差异 与 DQ9（即 DQbeta57Asp+）进行比较，其他方面与 DQ8 相同。 T/H2 CD4 + T/H1 T 细胞导致胰岛 β 细胞破坏。胰岛抗原 特定的 T/h2 细胞具有保护作用。一种 DQ 关联机制 易感性是指易感等位基因结合并呈现出独特的 诱导主要 T/H1 反应的肽子集。抵抗的 结合其他胰岛抗原肽的等位基因可诱导 T/h2 回应。 拟议的实验将测试是否敏感和耐药 等位基因结合并呈递不同的肽子集。这将完成 通过生产表达相关 HLA DQ 的转基因小鼠 等位基因，以及人类 CD4，在存在和不存在鼠 CD4 的情况下。 已观察到 HLA DQ8.huCD4 转基因小鼠与 NOD 回交 5 发展为 I 型糖尿病。转基因小鼠和非转基因同窝小鼠 将监控控制装置的自动自发发展 胰岛细胞抗原抗体和 HLA DQ 限制 T 细胞反应 GA65 和前胰岛素原。未经治疗的转基因小鼠和转基因小鼠 用重组人 GD65 和前胰岛素原进行免疫的将用于 评估 DQ8、DQ7 和 DQ6 向 T 细胞呈递的肽。这将是 通过使用这些小鼠的淋巴结和脾脏 T 细胞来进行小鼠实验 T 细胞杂交瘤，DW5147。将分析所得杂交瘤 HLA DQ 限制性和肽特异性。 最后，HLA DQ8 呈递的那些肽表位将用于 检测糖尿病前期和近期发病的 HLA DQ 受限反应 糖尿病患者。