ANALYSIS OF SINGLE FLUORESCENT MOLECULES TRAPPED INSIDE SMALL LIPID VESICLES

捕获在小脂质囊泡内的单个荧光分子的分析

基本信息

  • 批准号:
    6349400
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.47万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    2000-09-01 至 2001-08-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

A rationale for improvement of the response (fractional change in fluorescence, (F/F) of a voltage-sensitive dye has been tested. Improvement of current voltage-sensitive dyes which currently show (F/F of 10% at best, would be of great interest to neuroscientists. The two-photon action cross-section of Di-8-ANEPPS, a bright, photostable, relatively non-cytotoxic dye was measured relative to Rhodamine B in MeOH from 800-1000 nm. A two-photon exctiation wavelength was chosen to maximize the magnitude and slope of the cross-section with respect to wavelength. Hela cells were loaded with the dye and imaged before and after K+ depolarization to quantify (F/F for a large change in membrane potential. No conclusive improvement was observed using two-photon excitation. Further investigation of the same molecule using patch-clamp techniques and different excitation wavelengths is underway.
缓解改善的依据( 荧光,(F/F)的电压敏感染料已被测试。 对目前表现出电压敏感性的染料的改进 (F/F最多为10%,这将引起神经科学家的极大兴趣。 Di-8-ANEPPS的双光子作用截面, 光稳定的、相对无细胞毒性的染料相对于 MeOH中的罗丹明B,800-1000 nm。 双光子激发 选择波长以最大化 相对于波长的横截面。 Hela细胞负载有 在K+去极化之前和之后对染料进行成像以定量(F/F 膜电位的巨大变化。 无明显改善 使用双光子激发观察。 进一步调查 使用膜片钳技术, 激发波长正在进行中。

项目成果

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