A fluorescent reporter detecting precise homologous recombination transgenesis activity

检测精确同源重组转基因活性的荧光报告基因

基本信息

  • 批准号:
    9255240
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 22.5万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    2016
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    2016-09-23 至 2017-06-30
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

The broad, long term objective and specific aims of the fast­track SBIR research are to create a  reagent, RecombiRED, for use in microinjection of embryos for identifying a subset of embryos  as recombination competent injections. The ability to quickly identify genome editing events in  an embryo allows researcher to quickly make precision animal models of human disease states.  Precise animal models allow for greater scientific understanding of a human disease and  provides a robust platform for drug discovery screening.  The RecombiRED reagent relies on  induced fluorescence in response to activation of homologous recombination repair within the  embryo.  Detection of homologous recombination repair in injected embryos with RecombiRED  allows animal husbandry and further screening efforts to be restricted to a subset of embryos by  up to 100x for having a desired precise knockin of new genetic material at a specific genetic  locus. The phase I research adapts a the RecombiRED reagent developed in C  . elegans model  organism to have the appropriate expression control elements enabling sufficient activity in  zebrafish embryo.  In Phase II, the additional research further optimizes parameters of the  RecombiRED reagent to minimize false positive and false negative readouts, which then allows  maximal forecasting of targeted genome edit events.  Finally, a set of 15 real­world transgenesis  projects are used as premarket beta­test to demonstrate the ubiquity and robustness of the  RecombiRED for simplifying discovery of genome editing in the creation of animals models for  use in drug discovery.
快速跟踪SBIR研究的广泛,长期目标和具体目标是创建一个 用于胚胎显微注射以鉴定胚胎亚群的试剂,RecombiRED 作为重组主管注射剂。快速识别基因组编辑事件的能力, 胚胎使研究人员能够快速制作人类疾病状态的精确动物模型。 精确的动物模型可以更好地科学理解人类疾病, 为药物发现筛选提供了强大的平台。RecombiRED试剂依赖于 诱导荧光响应于在细胞内同源重组修复的激活, 用RecombiRED检测注射胚胎中的同源重组修复 允许畜牧业和进一步的筛选工作仅限于胚胎的子集, 高达100倍,用于在特定遗传位点上具有新遗传物质的所需精确敲入。 I期研究采用了在秀丽隐杆线虫模型中开发的RecombiRED试剂 生物体具有适当的表达控制元件,使得能够在以下方面具有足够的活性: 在第二阶段,额外的研究进一步优化了斑马鱼胚胎的参数。 RecombiRED试剂可最大限度地减少假阳性和假阴性读数, 最后,一组15个真实的虚拟世界转基因 项目被用作上市前beta测试,以证明 RecombiRED用于简化基因组编辑在动物模型创建中的发现, 用于药物发现。

项目成果

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Trisha Brock其他文献

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  • 资助金额:
    $ 22.5万
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  • 批准号:
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  • 财政年份:
    2008
  • 资助金额:
    $ 22.5万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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