Mre11-Dependent DNA Damage Responses in Breast Cancer Pathogenesis

点击翻译按钮获取中文摘要

Project Summary Abstract  The Mre11-­Rad50-­Nbs1 complex is a pleiotropic sensor of DNA double strand breaks that promotes ATM  signaling, cell cycle checkpoint activation, and DNA repair. We have recently shown that Mre11 is an essential  component of the tumor suppressive DNA damage response (DDR) in a murine model of breast cancer. Mre11  pathway deficiency has also been reported in a significant fraction of human triple negative  (estrogen/progesterone receptor negative, HER2 non-­amplified) breast cancers (TNBC), which are  characterized by rampant chromosomal instability and nearly universal inactivation of the p53 pathway. In this  project, we will investigate a role for Mre11-­mediated tumor suppression in murine models of TNBC initiated by  c-­Myc overexpression, Rb1 deletion, and/or p53 deficiency. In Aim 1, we will analyze the effect of Mre11  deficiency on cell cycle checkpoint activation in response to oncogene-­induced DNA damage. Time lapse  microscopy of DNA damage and cell cycle state transitions will be performed in preneoplastic primary  mammary epithelial cells.  In Aim 2, we will use single cell whole genome sequencing to quantify stochastic  chromosomal aberrations that accumulate during oncogene-­induced replication stress in primary mammary  epithelial cells. The effect of Mre11 and/or p53 deficiency on the chromosomal instability phenotype at different  stages of tumorigenesis will be analyzed. In Aim 3, we will engineer Mre11 mutations in a Rb1/p53-­deficient  murine TNBC model to measure effects on tumor latency. Gene expression and genomic scar signatures  associated with Mre11 deficient breast cancers will be determined, and compared to signatures of Brca1  deficiency. A panel of pharmacological DDR pathway inhibitors will be tested to identify targetable synthetic  lethal vulnerabilities of Mre11 deficiency. Collectively, this project will provide insight into p53-­independent  mechanisms of Mre11-­mediated tumor suppression, and identify molecular signatures and therapeutic  susceptibilities of Mre11 deficient breast cancer.