Caractérisation de l'interaction de l'entérotoxine STb d'escherichia coli avec des modèles membranaires et des cellules en cultures

大肠杆菌内毒素 STb 与培养物膜和细胞模型相互作用的表征

基本信息

  • 批准号:
    139070-2006
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.56万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    加拿大
  • 项目类别:
    Discovery Grants Program - Individual
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    加拿大
  • 起止时间:
    2006-01-01 至 2007-12-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Les Escherichia coli entérotoxinogènes élaborent des toxines sensibles à la chaleur (LTI et LTII) ainsi que des toxines stables à la chaleur (STa,  STb et EAST1). STb est une toxine de 5,2kDa responsable de diarrhées chez le porcelet et d'autres animaux, incluant l'Homme.  Récemment un récepteur fonctionnel (sulfatide) a été mis en évidence pour STb. La formation d'oligomères a aussi été observée. De plus, comme des études préliminaires ont suggérées que STb peut former un canal dans une membrane lipidique et que dans un modèle animal, STb était internalisé dans les cellules épithéliales intestinales et que ce phénomène semble un pré-requis pour l'expression de la toxicité, nous proposons de vérifier si STb peut former des pores dans un modèle de membranes de bordure en brosse et en bicouche lipidique planaire. Ce phénomène sera étudié en détail et une étude structure-fonction, à l'aide de mutants ponctuels de STb, sera réalisée. L'internalisation de STb dans les cellules pourra être disséquée dans un modèle cellulaire (NIH-3T3) afin de comprendre l'endocytose et les voies utilisées. Le sulfatide, comme récepteur, et l'oligomérisation de STb seront aussi étudié en regard de l'endocytose. La cible intracellulaire sera mise en évidence et ultimement les voies signalétiques empruntées par la toxine permettront de comprendre le mécanisme d'action de STb. Ces travaux sur l'entérotoxine STb devraient combler le manque de connaissance sur l'interaction de la toxine avec la surface cellulaire ainsi que le processus d'internalisation/endocytose. L'implication du sulfatide, le récepteur de STb, représente aussi un aspect central à évaluer dans ces processus. Globalement ce programme de recherche devrait permettre l'avancement des connaissances sur les processus physiologiques impliqués ainsi que de préciser l'aspect structure-fonction en relation avec la formation de pores et l'internalisation/endocytose de STb. L'élucidation de la cible cellulaire et des voies signalétiques devrait conduire à la modélisation du mécanisme d'action de STb. Ultimement, cette connaissance permettra de proposer des moyens pour prévenir et/ou traiter la diarrhée due à STb en ciblant une étape particulière du mécanisme d'action.
大肠埃希氏菌内毒素产生菌可产生慢性敏感性毒素(LTI和LTII),也可产生慢性稳定性毒素(STa、STb和EAST 1)。STb是一种5,2kDa的毒素,对瓷器和其他动物(包括人)的肠道有反应。寡聚体的形成也要观察。此外,由于初步研究表明,STb可能形成一个通道在一个膜上,并在一个modèle动物,STb的内部化在细胞内,STb的现象是一个先决条件,为表达毒性,我们的建议验证了STb可能形成一个孔在一个modèle膜上的边界,并在bicouche平面。这一现象在详细研究和结构基础研究中有现实意义。STb在细胞内的内化通过一种细胞模型(NIH-3 T3)进行,以理解内吞作用和利用途径。在胞吞作用方面,还研究了硫苷脂(作为受体)和STb血清寡聚化。细胞内的细菌可通过毒素渗透来了解STb的作用机制,从而使细胞内的信号通路消失并最终消失。本研究通过对STb内毒素与细胞表面相互作用的认识,揭示了STb的内化/内吞过程。硫苷的影响,STb的接收者,也代表了评估过程中的一个重要方面。全球化研究计划旨在开发Navisphere对STb的生理过程的认识,这些生理过程是为了精确了解STb的结构-形态与孔隙形成和内化/内吞的关系。L'élucidation de la cible cellularaire et des voies signalétiques devrait mesquire à la modélisation du mécanisme d'action de STb.最后,这一认识允许提议者提出方法,以便在特定的行动机制下提供和/或提供STb所需的资金。

项目成果

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  • 通讯作者:
    McLeod, Robin S.

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