Ingénierie intégrée des bioprocédés par PCR quantitative à grand débit

PCR 定量生物过程集成工程

• 批准号: 422533-2012
• 负责人: Garnier, Alain
• 金额: $ 6.14万
• 依托单位: Université Laval
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Research Tools and Instruments - Category 1 (<$150,000)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2011-01-01 至 2012-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=495812
• 关键词: Ing; nierie; int; gr; des

Notre laboratoire a développé depuis une quinzaine d'années une plateforme exceptionnelle de criblage, d'analyse, de modélisation et d'optimisation des bioprocédés de production de produits biologiques à très haute valeur ajoutée, tels les protéines recombinantes, les virus pour la vaccination ou la thérapie génique et les cellules souches (ou les cultures primaires) pour la thérapie cellulaire. À titre d'exemple, dans le cadre du développement d'une thérapie cellulaire pour la dystrophie musculaire de Duchenne (DMD), nous avons conçu un milieu de culture unique pour la multiplication de cellules musculaires (myoblastes) en criblant d'une manière exhaustive les effets individuels et synergiques de plus d'une soixantaine d'additifs, ce qui a impliqué un nombre d'expérience théorique de plus de 2^60 = 10^18 expériences. Un tel criblage est à notre connaissance d'une ampleur sans égale dans la littérature. Il a permis de développer un milieu de culture entièrement défini qui performe mieux que les milieux non-définis précédemment utilisés, ce qui a contribué à rendre les cellules produites plus sécuritaires pour les essais cliniques. Pour ce faire, nous avons entre autre mis à contribution l'analyse de la transcription de plus de 100 gènes de cytokines, facteurs de croissance, facteurs autocrines et récepteurs de ces molécules par RT-PCR. Cette étape est présentement le maillon faible de notre plateforme puisque nous n'avons accès qu'à des appareils non-quantitatifs et à faible débit. La présente demande vise à compléter notre arsenal de moyens analytiques avec un appareil de RT-PCR quantitatif (qRT-PCR) à lecture multiple. À notre banque de gènes actuelle, nous pourrions alors rajouter toute une série de gènes spécifiques à différents types cellulaires et tissus. Combinée à la qRT-PCR, cette banque nous permettrait alors de suivre au cours des cultures l'évolution précise des profils d'expression de différents gènes critiques à la production de certains types cellulaires et ainsi contribuer à une amélioration plus poussée et plus rapide de bioprocédés d'une grande importance pour le développement de plusieurs thérapies, basées sur l'utilisation de protéines recombinantes, de vecteurs viraux ou de cellules de différents tissus.

Notre laboratoire a décampé depuis une quinzaine d'années une plateforme exceptionnelle de criblage，d'analyze，de modélisation et d'optimization des bioprocédés de production de biologiques à très haute valeur ajoutée，tels les Protéines recombinant，les virus pour la vaccination or la thérapie génique et les cellules souches（ou les cultures primaires）pour la thérapie cellaire.在杜氏肌营养不良症（DMD）的细胞治疗中，我们发现了一种独特的培养环境，以促进肌细胞增殖（myoblastes）en criblant d'une manière exhaustive les effets individuels et synergiques de plus d'une soixantaine d'additifs，这意味着一个理论上的实验数为2^60 + 10^18。一个字母是我们对文学中一个不受欢迎的词的认识。Il a permis de décrieu de culture entitèrement defini qui performe mieux que les milieux que les milieux non-décédemment utilisés，ce qui a contribution à rendre les cellules produites plus sécuritaires for les essais cliniques.为此，我们将通过RT-PCR对超过100种细胞因子的转录、转录因子的产生、转录自分泌因子的产生和分子的接收进行分析。这一胶带是我们无法使用非定量和易磨损的设备的平台的主要部件。La presente demande vise à compléter notre arsenal de moyens analytiques avec un appareil de RT-PCR quantitatif（qRT-PCR）à lecture multiple.我们的现有性别银行，我们的客户都是不同类型的细胞和组织的特定性别的人。Combinée à la qRT-PCR，cette banque nous permettrait alors de suivre Au cours des cultures l'évolution précise des profils d'expression de différents gènes critiques à la production de certains types cellulaires et ainsi contributor à une amélioration plus poussée et plus rapide de bioprocédés d'une unique importance pour le dérépement de plusieurs thérapies，basées sur l'utilisation de Protéines recombination，或不同组织的细胞。