Étude de la relation structure/fonction du canal sodique épithélial: rôle de la partie extracellulaire dans la régulation du canal

运河管理关系结构/功能的研究：ràle de la party extracellulaire dans la régulation du canal

• 批准号: RGPIN-2014-04569
• 负责人: Chraibi, Ahmed
• 金额: $ 1.89万
• 依托单位: Université de Sherbrooke
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Discovery Grants Program - Individual
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2016-01-01 至 2017-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=611114
• 关键词: tude; de; la; relation; structure

Le canal sodique épithélial, ENaC est une protéine transmembranaire impliquée dans de nombreuses fonctions physiologiques telles que la régulation de la pression sanguine, le contrôle de la clairance du fluide pulmonaire et la réabsorption du sodium dans le néphron distal sensible à l’aldostérone. Par sa localisation au niveau apical des cellules épithéliales, ENaC est exposé à une grande variation de la concentration du sodium et des protons extracellulaires. La fonction d’ENaC peut être régulée par plusieurs facteurs hormonaux (principalement l’aldostérone et la vasopressine) et des facteurs non hormonaux. Plusieurs travaux ont montré que le canal ENaC est régulé par le sodium extracellulaire (phénomène de self-inhibition), le pH et les sérine-protéases. Toutefois, la nature et les mécanismes moléculaires de ces différentes voies de régulation ainsi que le rôle fonctionnel de la partie extracellulaire du canal demandent à être bien élucidés. Notre programme de recherche a pour but d'étudier la relation structure fonction du canal ENaC et de clarifier les mécanismes de ces différentes voies de régulation. Nos objectifs spécifiques sont donc : 1) Déterminer les mécanismes moléculaires de la self-inhibition à l’échelle unitaire et explorer les paramètres biophysiques du canal pour comprendre ses modes d’activité en présence des différentes conditions physiologiques liées au sodium extracellulaire. 2) Identifier les résidus du domaine extracellulaire impliqués dans la self-inhibition. 3) Étudier les effets du pH extracellulaire sur la fonction du canal et identifier les acides aminés impliqués dans ces effets. 4) Déterminer les sites impliqués dans l’activation du canal par les sérine-protéases et étudier le lien entre cette activation et la régulation du canal par le pH et le sodium extracellulaires. Pour réaliser nos objectifs, nous allons utiliser la mutagenèse dirigée (alanine et cystéine scaning) et l’analyse fonctionnelle par deux techniques électrophysiologiques : le patch-clamp et le voltage-clamp. Une collaboration avec le Pr P. Lavigne de l’Université de Sherbrooke, nous permettra de combiner la modélisation moléculaire aux différentes approches utilisées dans notre laboratoire. Nos résultats préliminaires montrent l’importance de la région terminale de la partie extracellulaire du canal ‘knuckle domain’ et suggèrent l’existence d’une relation entre les trois voies de régulation que nous avons étudiées. Notre programme de recherche permettra de mieux comprendre le rôle de la partie extracellulaire d'ENaC dans la régulation de ce canal par le sodium et le pH extracellulaires. De plus, il nous permettra d'explorer les mécanismes moléculaires et les sites d'activation du canal par les sérine-protéases, une voie de régulation que nous avons mis en évidence.

这条运河的纯碱、跨膜、跨膜和生理功能都是乐观的，L‘aldostérone’aldostérone。Par sa LOCALIZATION au niveau apical des cell ulesépithéliales，ENaC est Exposéune Grande Variance de la Content Du Na et des Proton Exellulaire.激素(主要是L的激素和血管加压素)和非激素的激素。Plusieur Travaux on t Montréque le Canal ENaC est régulépar le Na Exellulaire(Phénomène de Self-Inhibition)，le pH et les Séine-protéase.S说：“这是一条自然和自然之路。 圣母院的一个倒而不是关系的结构功能的运河ENaC和de clariator Les mécanismes de ces différentes voies de régation。No s Object f spécifique sont don： 1)L的自我抑制和探索者的生物物理模型和条件生理条件的研究。 2)识别细胞外隐含的Les résidus du Domaine Exellulaire Dans la的自我抑制。 3)pH胞外效应与管内酸度的关系：S隐含的胞外效应与S效应。 4)明确了S对L的激活，包括S的内分泌-保护酶等，以及细胞外的pH和钠离子的激活。 [中英文摘要][晓雨-0920交稿]L等人分析了膜片钳和电压钳等电生理技术。L所在的舍布鲁克大学与联合国教科文组织合作，与现代化合作伙伴合作，走上了实用化的道路。L先生对运河外地区的重要终点站的重要性与L先生的存在关系提出了建议。 这是一项新的研究计划，其目的是为了更好地利用细胞外资源。再加上，米卡尼斯探险家和S的运河保护者的激活和遗失的遗迹是一样的。