Aptamer-based surface plasmon resonance detection of legionella pneumophila in water systems

基于适体的表面等离子体共振检测水系统中的嗜肺军团菌

• 批准号: 521532-2018
• 负责人: Tabrizian, Maryam
• 金额: $ 11.31万
• 依托单位: McGill University
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Strategic Projects - Group
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2019-01-01 至 2020-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=693878
• 关键词: Aptamer; based; surface; plasmon; resonance

La maladie du légionnaire est causée par la bactérie Legionella pneumophila (Lp). Plusieurs systèmes hydriques, tels que les tours de refroidissement et les systèmes de distribution d'eau chaude, peuvent être contaminés par Lp. La production d'aérosols par ces systèmes permet à cette bactérie de se transmettre à l'humain. Plusieurs épidémies de cette maladie sont répertoriées chaque année. Par exemple, la ville de Québec a souffert d'une épidémie majeure en 2012. La surveillance de ces systèmes est primordiale pour diminuer le risque d'infection et limiter au maximum l'éclosion d'épidémies. La détection de Lp dans les systèmes hydriques est présentement effectuée par culture ou par qPCR. Ces méthodes sont fastidieuses et couteuses, et dans le cas de la culture, produisent des résultats dans un délai de deux semaines. En collaboration avec Produits Chimiques Magnus Lté, nous proposons de développer une nouvelle méthode de détection basée sur la reconnaissance de Lp par des aptamères. Les aptamères seront développés grâce à la technique «SELEX». Les meilleurs aptamers seront alors immobilisés sur la surface du prisme d'un capteur de résonance plasmonique de surface (SPR) et leur capacité à détecter la présence de Lp dans des échantillons d'eau provenant de différentes sources contaminées par Lp sera examinée. Cette technique permet de mesurer en temps réel l'attachement d'une molécule, préalablement immobilisée sur sa surface, à sa cible. Ainsi, l'utilisation d'aptamères et du SPR devrait permettre de détecter rapidement et spécifiquement Lp dans les systèmes hydriques. Le système sera ensuite optimisé en modifiant la chimie de surface et en utilisant un second aptamère couplé à une nanoparticule d'or pour amplifier le signal et diminuer la limite de détection. De plus, l'approche de laboratoire-sur-puce sera utilisée pour abaisser le volume d'eau et l'enrichir par Lp. Le but est d'atteindre une limite de détection de 10-100 UFC Lp /ml (limite pour amorcer le traitement). Ce projet devrait permettre de développer une nouvelle méthode de détection qui pourra être utilisée de façon continue pour surveiller adéquatement les systèmes hydriques et minimiser les cas de maladie du légionnaire.

军团病由嗜肺军团菌（Lp）引起。Plusieurs systèmes planques，tels que les图尔斯图尔斯de refroxissement et les systèmes de distribution d'eau chaude，peuvent être contaminés par LP.通过这些系统可以生产气溶胶，这些系统可以将气溶胶输送给人类。这种疾病的几位医生每年都要来。另一方面，魁北克市在2012年遭遇了一场不可抗力的危机。这些系统的监测主要是为了减少感染风险，并最大限度地限制Au感染。通过培养或qPCR可有效检测培养系统中的Lp。这些方法非常讲究，而且在文化领域，两个星期的时间里产生了结果。通过与Produits Chimiques Magnus Lté公司的合作，我们提出了一种基于适配体检测Lp的新方法。这些适配器在“SELEX”技术中表现得非常出色。最好的适体血清可固定在表面共振等离子体捕获器（SPR）的棱镜表面，并可检测不同来源污染的Lp血清中Lp的存在。这种测量技术可以测量一个分子的附着，在表面上固定。此外，适体的利用和SPR使Lp在细胞系统中的检测速度和特异性得以提高。Le système sera ensuite optimisé en modifiant la chimie de surface et en utilisant un second aptamère coupé à une nanoparticule d'or pour amplifier le signal et diminuer la limite de detection.此外，还可使用紫上实验室的方法，以减少Lp的水量和富集。但应达到10-100 UFC Lp /ml的检测限（治疗限制）。该项目旨在制定一种新的检测方法，该方法将继续用于监测系统的安全状况，并将军队的疾病情况降至最低。