孕酮在家鸡蛋壳钙化形成中的作用机理研究

批准号:
31060305
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
26.0 万元
负责人:
孙杰
依托单位:
学科分类:
C1703.家禽及其他经济动物种质资源与遗传育种学
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
王金富、陈宏、李桂芳、张文祥、姚秀娟、王遵宝
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中文摘要
研究表明家鸡蛋壳中钙的形成由子宫细胞分泌,孕酮在调控子宫细胞中钙的波动时起一定的作用,而其在蛋壳钙化过程中的作用机理目前还不清楚。为解释蛋壳钙化形成的分子机理,本研究采用实时定量 PCR、扫描电镜和血液生理生化指标测定等方法对形成蛋壳钙化的相关基因、蛋壳超微结构和血液中钙离子和孕酮的含量进行研究;同时构建Cabp-d28k基因启动子的荧光报告载体,转染体外培养的子宫内膜细胞,通过在培养细胞中添加孕酮,测定载体中荧光素酶的活性变化来确定孕酮对Cabp-d28k基因启动子转录起着"开关"的作用;并结合在产蛋过程中蛋鸡体内注射孕酮及拮抗剂对产蛋时间和蛋壳结构的影响,分析孕酮在蛋壳钙化时所起的作用,从而揭示蛋壳钙化时起重要调控作用的因子,为阐明蛋壳钙化形成的细胞分子机理提供理论依据。
英文摘要
蛋壳形成于输卵管子宫部,孕酮对蛋鸡的产蛋行为发挥着重要作用。本课题对孕酮在蛋壳钙化形成时作用机理进行了深入研究。.1、产蛋高峰期的蛋鸡,蛋进入输卵管子宫部的不同时间点取蛋壳、子宫和血液,X射线能谱仪、扫描电镜测定蛋壳元素含量,内、外表面和横断面的超微结构;测定血钙含量和孕酮浓度;检测子宫部Cabp-d28k、Ca2+-ATPase、CA、PGR基因的表达规律。结果表明:蛋壳形成过程中钙沉积量逐渐增多,蛋进入子宫前1h到进入子宫5h钙沉积最多,之后钙沉积量减少;蛋壳形成过程中横断面变厚,椎体层逐渐形成,外表面裂隙的数量、深度及内表面的突起减少,纤维层的致密性、有序性下降;Cabp-d28k、Ca2+-ATPase表达量在蛋进入子宫15h达到最大,产蛋后逐渐下降,PGR呈先上升后下降的变化规律,CA在蛋进入子宫5h表达量最大,随后逐渐下降。.2、孕酮及其受体拮抗剂处理蛋鸡,蛋进入子宫不同时间点和不同处理组取样,结果表明:两种处理都能够增加蛋壳厚度和钙沉积;孕酮处理后蛋壳强度高于对照组,而拮抗剂处理则低于对照组,说明孕酮不仅能够增加蛋壳厚度,而且可以增强蛋壳强度,而拮抗剂组虽然增加了蛋壳厚度,但是蛋壳强度减弱;孕酮组蛋壳钙元素含量高于对照组(P<0.01),拮抗剂组蛋壳钙元素含量高于对照组(P<0.05);孕酮抑制血钙含量升高,并对Cabp-d28k、Ca2+-ATP、CA表达起负调控作用;产蛋时间孕酮组大于对照组(P<0.01),拮抗剂组小于对照组(P<0.05)。.3、培养子宫内膜上皮细胞和基质细胞,免疫组化鉴定呈阳性。添加孕酮促进基质细胞的增殖(P<0.05),孕酮+雌激素促进上皮细胞的增殖(P<0.05);雌激素+孕酮对培养细胞中Cabp-d28K表达量有促进作用,孕酮单独作用对Cabp-d28k表达量的影响不显著;Cabp-d28k分布于子宫部黏膜上皮的纤毛上皮细胞游离端,免疫组化呈棕黄色,基底层也有少量分布;Cabp-d28k启动子中有与经典孕激素应答元件(PRE)相似的序列,Cabp-d28k表达变化与PR非常相似,尤其是在蛋鸡产蛋过程中体内注射孕酮后Cabp-d28k和PR基因表达量明显下降,分析认为孕激素与PR结合,分泌某种或某些因子抑制Cabp-d28k的表达,同时也表明孕酮对二者表达均起负调控作用,进一步揭示了孕酮在蛋壳钙化形成时的作用机理。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2010
期刊:中国畜牧兽医
影响因子:--
作者:姚秀娟;孙杰;赵宗胜
通讯作者:赵宗胜
DOI:--
发表时间:2013
期刊:石河子大学学报(自然科学版)
影响因子:--
作者:赵海璇;赵宗胜;孙杰;王金富;孙国君;张星星
通讯作者:张星星
DOI:--
发表时间:2011
期刊:石河子大学学报(自然科学版)
影响因子:--
作者:孙杰;赵宗胜;赵海璇;李岩;姚秀娟
通讯作者:姚秀娟
DOI:--
发表时间:2010
期刊:安徽农业科学
影响因子:--
作者:孙杰;赵宗胜;姚秀娟;杨鑫;任士朋
通讯作者:任士朋
DOI:--
发表时间:2014
期刊:黑龙江畜牧兽医
影响因子:--
作者:孙杰
通讯作者:孙杰
基于海陆染色体片段代换系的棉花抗黄萎病基因鉴定及功能研究
- 批准号:32260513
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:34万元
- 批准年份:2022
- 负责人:孙杰
- 依托单位:
Gh4CL1基因在棉花应答黄萎病菌侵染中的功能及作用机制研究
- 批准号:31960438
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:40.0万元
- 批准年份:2019
- 负责人:孙杰
- 依托单位:
鸡快慢肌纤维分化相关IncRNA的鉴定及其调控机制的研究
- 批准号:31860641
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:39.0万元
- 批准年份:2018
- 负责人:孙杰
- 依托单位:
微管结合蛋白CLASP在棉花纤维发育和品质形成中的作用及分子机制研究
- 批准号:31760401
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:38.0万元
- 批准年份:2017
- 负责人:孙杰
- 依托单位:
鸡肉质风味性状差异表达基因、miRNA的筛选及鉴定
- 批准号:31660654
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:39.0万元
- 批准年份:2016
- 负责人:孙杰
- 依托单位:
国内基金
海外基金
