KLD-12多肽/ rhBMP-2纤维凝胶的构建及复合BMSCs微创下植入诱导椎体间融合的试验研究

批准号:
81560363
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
37.0 万元
负责人:
孙建华
依托单位:
学科分类:
H0608.骨、关节、软组织退行性病变
结题年份:
2019
批准年份:
2015
项目状态:
已结题
项目参与者:
陈磊、方钦正、邵辉、卞正君、梁相辰、李相晨、于洋
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中文摘要
rhBMP-2用于腰椎椎体间融合时,剂量越大,脊神经炎等并发症越高。组织工程技术为减少rhBMP-2剂量提供了可能。本课题拟利用KLD-12多肽支架材料药物缓释的特性,复合rhBMP-2,构建KLD-12多肽/ rhBMP-2纳米纤维凝胶。以新西兰大白兔及绵羊为研究对象,体外KLD-12多肽/ rhBMP-2凝胶三维培养BMSCs二周。体内将KLD-12多肽/ rhBMP-2/BMSCs植入绵羊腰椎椎体间隙。应用大体观察、AFM、组织化学染色、免疫荧光染色、RT-PCR、X线、CT等技术,研究:1)KLD-12多肽/ rhBMP-2凝胶诱导异位成骨的生物活性;2)KLD-12多肽/ rhBMP-2凝胶诱导BMSCs向成骨细胞分化的生物活性;3)KLD-12多肽/ rhBMP-2/BMSCs凝胶诱导异位成骨活性及用于腰椎椎体间融合的效果。为治疗椎间盘晚期退变及腰椎不稳寻找新的微创治疗方案。
英文摘要
When used rhBMP-2 in lumbar interbody fusion, the complications as postoperative radiculitis associated with rhBMP-2 dose were higher. Tissue engineer offers the possibility to reduce the rhBMP-2 dose. This project intends to composite rhBMP-2 and builds KLD-12 peptide/rhBMP-2 nano-fiber hydrogel by taking advantage of the characteristics of the KLD-12 peptide scaffold materials for drug delivery. The New Zealand rabbits and local sheep are employed as experimental animals, BMSCs is cultured in the KLD-12 peptide/rhBMP-12 hydrogel for two weeks in vitro. The KLD-12 peptide/rhBMP-12/BMSCs are implanted in sheep lumbar vertebral body gap in vivo. General observation, AFM, Histochemical staining, Immunofluorescence staining, RT-PCR, X-ray and CT will be employed to study: 1) KLD-12 peptide/rhBMP-12 hydrogel-induced biological activity of the ectopic bone formation; 2) KLD-12 peptide/rhBMP-12 hydrogel-induced biological activity of BMSCs to differentiate into osteoblasts; 3) KLD-12 peptide/rhBMP-12 /BMSCs hydrogel-induced biological activity of the ectopic bone formation and the effect in lumbar interbody fusion. The object is to seek a new minimally invasive treatment options for intervertebral disc degeneration and lumbar instability.
rhBMP-2用于腰椎椎体间融合时,剂量越大,脊神经炎等并发症越高。组织工程技术为减少rhBMP-2剂量提供了可能。本课题利用KLD-12多肽支架材料药物缓释的特性,复合rhBMP-2,构建KLD-12多肽/ rhBMP-2纳米纤维凝胶。以新西兰大白兔为研究对象,体外KLD-12多肽/ rhBMP-2凝胶三维培养BMSCs二周。体内将KLD-12多肽/ rhBMP-2/BMSCs植入兔腰椎椎体间隙,应用大体观察、AFM、组织化学染色、免疫荧光染色、RT-PCR、X线、CT等技术,研究:KLD-12多肽/ rhBMP-2凝胶诱导异位成骨的生物活性;KLD-12多肽/ rhBMP-2凝胶诱导BMSCs向成骨细胞分化的生物活性;KLD-12多肽/ rhBMP-2/BMSCs凝胶诱导异位成骨活性及用于腰椎椎体间融合的效果。研究结果证实:1)、KLD-12多肽/ rhBMP-2凝胶可缓慢释放rhBMP-2,并呈现先快后慢的缓释趋势。随着时间延长,凝胶释放的rhBMP-2含量逐渐减少,且浓度为300ng/ml rhBMP-2凝胶的整体缓释率要高于浓度为100ng/ml。 2)、KLD-12多肽/ rhBMP-2凝胶诱导BMSCs表达ALP、骨钙蛋白、Ⅰ型胶原、骨钙蛋白及相关基因mRNA,KLD-12多肽/ rhBMP-2凝胶诱导BMSCs成骨分化的生物活性良好。3)、KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶复合BMSCs植入兔臀肌内,X线、CT、大体观察、组织形态学、ALP活性检测证实,KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶复合BMSCs诱导异位成骨活性良好。4)、KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶植入兔椎体间隙,术后12周,X线及Micro-CT证实,KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶成功诱导椎体间融合。5)、KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶复合BMSCs植入兔椎体横突间,术后12周,大体观察、X线及HE染色证实,KLD-12多肽/rhBMP-2 /BMSCs凝胶可诱导横突间融合。课题组成功构建了具有诱导成骨活性KLD-12多肽/rhBMP-2纳米凝胶,该凝胶具有良好的成骨活性及诱导活性,复合BMSCs,可诱导兔横突间骨性融合,成骨活性良好。是较理想的微创下植入、促进椎体间融合的新型组织工程材料。
期刊论文列表
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专利列表
DOI:--
发表时间:2016
期刊:中国修复重建外科杂志
影响因子:--
作者:吴彬;陈磊;李相晨;于洪涛;杨海;梁相辰;孙建华;董金波
通讯作者:董金波
Repair of intervertebral disc degeneration using KLD-12/TGF-beta 1 fiber gel combined with BMSCs in a rabbit model
KLD-12/TGF-β1纤维凝胶联合BMSC修复兔模型退变椎间盘
DOI:--
发表时间:2017
期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL MEDICINE
影响因子:0.1
作者:Li Xiangchen;Shao Hui;Wu Bin;Yu Yang;Du Yan;Liu Shaozheng;Sun Jianhua
通讯作者:Sun Jianhua
DOI:--
发表时间:2016
期刊:中国修复重建外科杂志
影响因子:--
作者:梁相辰;孙建华;卞正君;邵辉;黄朝庆;李相晨;于洋
通讯作者:于洋
Experimental Study of Ectopic Osteogenesis of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Induced by KLD-12 Polypeptide/rhBMP-2/BMSC Composite Fiber Gels
KLD-12多肽/rhBMP-2/BMSC复合纤维凝胶诱导骨髓间充质干细胞异位成骨的实验研究
DOI:10.1166/jbt.2019.1990
发表时间:2019-03
期刊:Journal of Biomaterials and Tissue Engineering
影响因子:0.1
作者:Wang Bingxuan;Du Yan;Li Xiangchen;Sun Jianhua
通讯作者:Sun Jianhua
Effects of KLD-12/Recombinant Human Bone Morphogenetic Protein-2 Nanofiber Scaffold on the Osteogenic Activity of Rabbit Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells
KLD-12/重组人骨形态发生蛋白2纳米纤维支架对兔骨髓间充质干细胞成骨活性的影响
DOI:10.1166/jbt.2018.1719
发表时间:2018
期刊:Journal of Biomaterials and Tissue Engineering
影响因子:0.1
作者:Du Yan;Wu Bin;Li Xiangchen;Sun Jianhua
通讯作者:Sun Jianhua
椎间盘组织工程材料KLD-12多肽/ TGF - β1纳米纤维凝胶的构建及复合BMSCs治疗椎间盘退变的试验研究
- 批准号:81160224
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:50.0万元
- 批准年份:2011
- 负责人:孙建华
- 依托单位:
国内基金
海外基金
