FTCD-L蛋白在植物细胞高尔基体上的分布与作用
结题报告
批准号:
30971435
项目类别:
面上项目
资助金额:
31.0 万元
负责人:
李岩
依托单位:
学科分类:
C0701.细胞器及亚细胞结构、互作与功能
结题年份:
2012
批准年份:
2009
项目状态:
已结题
项目参与者:
张巍、李春芳、曹启江、张宇、李学军
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中文摘要
构建拟南芥FTCD-L基因的GST标签原核表达质粒,在细菌中诱导表达FTCD-L蛋白;利用GST亲和层析柱纯化FTCD-L蛋白,并制备相应的特异抗体;通过免疫标记方法,结合荧光和电子显微镜观察,精确确定FTCD-L蛋白在植物细胞高尔基体上的分布。通过共沉淀等方法,分析FTCD-L蛋白是否与微管结合;通过免疫荧光双标方法,分析FTCD-L与微管骨架在植物细胞中的相关;通过双转化方法,观察FTCD-L在拟南芥细胞中沿微管的动态分布。利用RNAi、T-DNA插入突变和超表达等分子遗传学方法,抑制或改变FTCD-L基因在拟南芥中的表达程度,并结合高尔基体分布与结构的荧光和电镜观察,分析FTCD-L蛋白在植物细胞高尔基体结构与功能方面的调控作用。我们希望在本项目的研究基础上,提出植物细胞内FTCD-L蛋白与微管骨架相互作用,进而参与高尔基体结构与功能调控的新观点。
英文摘要
构建了拟南芥FTCD-L 基因的His标签原核表达质粒,在细菌中诱导表达FTCD-L 蛋白;利用和层析柱纯化到FTCD-L 蛋白,并制备了相应的特异抗体;通过免疫印迹方法,确定该蛋白分子量约为33kDa,与理论预测的分子量相符。通过免疫标记方法,结合荧光和电子显微镜观察,精确确定FTCD-L 蛋白定位在植物细胞高尔基体上TGN的囊泡外周;并确定蛋白N端在与高尔基体TGN结合方面其主要作用。通过共沉淀等方法,发现FTCD-L 蛋白无法与微管结合。利用T-DNA 插入突变和超表达等分子遗传学方法,抑制或改变FTCD-L 基因在拟南芥中的表达程度,发现当在含高浓度琼脂(1-3%)的1/2MS培养基中生长时,培养7天的过表达拟南芥植株根的生长速度比野生型要快,而T-DNA line根的生长速度则慢于野生型。进一步分析发现,T-DNA line的根冠细胞分泌能力低于野生型拟南芥。有关研究表明,植物FTCD-L蛋白在高尔基体TGN囊泡形成或分泌方面起重要作用。
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
肌球蛋白 XI 驱动花粉管细胞器运动与囊泡运输分子机制
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    --
  • 资助金额:
    54万元
  • 批准年份:
    2022
  • 负责人:
    李岩
  • 依托单位:
SNARE蛋白复合体在花粉管顶端生长中的构成与作用
  • 批准号:
    31270230
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    80.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    李岩
  • 依托单位:
Cohen-Lenstra预测中若干问题的研究
  • 批准号:
    11101424
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    22.0万元
  • 批准年份:
    2011
  • 负责人:
    李岩
  • 依托单位:
SNARE蛋白在植物顶端生长细胞中的分布与作用
  • 批准号:
    30870143
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    30.0万元
  • 批准年份:
    2008
  • 负责人:
    李岩
  • 依托单位:
GRIP及其调节蛋白在植物细胞高尔基体上的存在与作用
  • 批准号:
    30570924
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    24.0万元
  • 批准年份:
    2005
  • 负责人:
    李岩
  • 依托单位:
单体肌动蛋白与环绕微丝束在植物顶端生长细胞中分布与作用
  • 批准号:
    30470109
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    21.0万元
  • 批准年份:
    2004
  • 负责人:
    李岩
  • 依托单位:
植物细胞a辅肌动蛋白的性质与功能
  • 批准号:
    30170458
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    17.0万元
  • 批准年份:
    2001
  • 负责人:
    李岩
  • 依托单位:
植物细胞高尔基体膜骨折
  • 批准号:
    30070049
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    14.0万元
  • 批准年份:
    2000
  • 负责人:
    李岩
  • 依托单位:
花粉及花粉管中膜骨架的研究
  • 批准号:
    39770049
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    11.5万元
  • 批准年份:
    1997
  • 负责人:
    李岩
  • 依托单位:
国内基金
海外基金