中药活性成分对肿瘤自杀基因旁杀伤效应增效作用及机理研究

自杀基因疗法是当前很有前景的肿瘤治疗方法，主要存在问题是转染率不高而对肿瘤杀伤力不足。促进缝隙连接细胞通讯（GJIC）、诱导癌细胞凋亡或改善荷瘤机体免疫状态能增强自杀基因旁杀伤效应，是提高疗效的重要策略，而中药在这三方面都有优势或潜力，且成本较低毒性小。前期工作已在细胞和动物水平筛选到3种能显著提高自杀基因（TK）疗效的中药成分/部位。在此基础上我们拟分别构建稳定表达TK-绿色荧光蛋白融合基因和红色荧光蛋白的癌细胞系，使旁杀伤效应更直观，药效检测更精确可信，以获得几个有肯定和明显作用的协同自杀基因系统的中药成分，再应用实时荧光RT-PCR、RNAi、液相芯片平台等技术研究其对GJIC及细胞凋亡相关基因表达、Cx分布及磷酸化状态等的影响，深入探讨其对旁杀伤效应增效的不同作用机理，明确其药理靶点。并探讨多种有效成分联合作用对自杀基因的协同性增效效应，为建立中药与肿瘤基因治疗联合疗法打下基础。