化学小分子探针用于研究信号转导过程的细胞增殖和凋亡

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    90913017
  • 项目类别：
    重大研究计划
  • 资助金额：
    50.0万
  • 负责人：
    张必良
  • 依托单位：
    中国科学院广州生物医药与健康研究院
  • 学科分类：
    C0705.细胞衰老、死亡及自噬
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

细胞增殖与凋亡是细胞的重要生命特征。研究细胞增殖和凋亡精确的生化机制以及相关信号转导途径的调控，对于了解相关疾病分子机制的异常以及疾病的治疗有着重要的意义。基于核酸变化与细胞增殖/凋亡的相关性以及对核酸检测方法的要求，本项目拟结合化学技术和生物技术，合成一系列基于"click"反应和Staudinger反应的小分子核酸探针；筛选出灵敏度高且于活细胞能应用的小分子探针；将开发的化学小分子探针应用于细胞增殖和凋亡的检测以及相关信号通路NF-κB和TGF-β通路的研究。本项目将提供新型的核酸分子探针，其应用有助于揭示与细胞增殖和凋亡相关信号通路的精密调控，为相关疾病的诊断提出新的思路。

结项摘要

细胞增殖与凋亡是细胞的重要生命特征。研究细胞增殖和凋亡精确的生化机制以及相关信号转导途径的调控，对于了解相关疾病分子机制的异常以及疾病的治疗有着重要的意义。基于核酸变化与细胞增殖/凋亡的相关性以及对核酸检测方法的要求，本项目拟结合化学技术和生物技术，合成一系列基于“click”反应的小分子核酸探针；筛选出灵敏度高的小分子探针；将开发的化学小分子探针应用于细胞增殖和凋亡的检测以及相关信号通路的研究。本项目已经合成了5-乙炔脱氧尿苷（EdU）、5-乙炔脱氧胞苷（EdC）和5-乙炔尿苷（EU）、5-乙炔胞苷（EC）以及相应的荧光染料，用于细胞内新合成的DNA与RNA的标记。实验结果表明EdU/EdC可以取代BrdU在细胞增殖检测中的应用，EdU/EdC检测方法更快速、灵敏和准确。同时，我们发现EdC比EdU细胞毒性更低，可用于长期培养细胞、标记新增殖的细胞，以及用于体内细胞示踪。为了筛选合适的可通过“click chemistry”对细胞新合成的RNA链进行标记的核苷酸分子衍生物，我们合成了一系列含有炔基官能团的核苷酸分子衍生物。通过筛选我们发现，如同EU分子，5-乙炔基胞苷(EC)可以通过生物合成被有效整合进细胞新合成的RNA链中，炔基修饰的嘌呤类核苷衍生物分子则不适合用于对细胞RNA合成的标记。本项目开发出的新型的核酸分子探针，其应用有助于揭示与细胞增殖和凋亡相关信号通路的精密调控，为相关疾病的诊断提出新的思路。

项目成果

期刊论文数量（5）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
5-Ethynylcytidine as a new agent for detecting RNA synthesis in cells by Click chemistry
5-乙炔胞苷作为检测细胞内 RNA 合成的新试剂
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    Analytical Biochemistry
  • 影响因子：
    2.9
  • 作者：
    Dezhong Qu;Li Zhou;Wei Wang;Zhe Wang;Guoxin Wang;Weilin Chi;Biliang Zhang
  • 通讯作者：
    Biliang Zhang
5-Ethynyl-20-deoxycytidine as a new agent for DNA labeling: Detection of proliferating cells
5-乙炔基-20-脱氧胞苷作为 DNA 标记的新试剂：增殖细胞的检测
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    Analytical Biochemistry
  • 影响因子：
    2.9
  • 作者：
    任晓帅;王国新;王喆;周丽;张必良;丛淑洁;渠德忠;池伟林;梁培州
  • 通讯作者：
    梁培州

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其他文献

KPNB1, XPO7 and IPO8 mediate the translocation of NF-B/p65 into the nucleus
KPNB1、XPO7 和 IPO8 介导 NF- 的易位
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    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    Traffic
  • 影响因子：
    4.5
  • 作者：
    梁培州;张海燕;王国新;张必良
  • 通讯作者：
    张必良
RNA 在核糖体催化蛋白质合成中的作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国科学(C辑:生命科学)
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王玮;张必良
  • 通讯作者：
    张必良
Biopesticide and insect preventing and controlling method
生物农药及昆虫防治方法
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2010
  • 期刊：
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张必良;胡美英;龚亮
  • 通讯作者：
    龚亮

其他文献

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张必良的其他基金

核酸化学修饰偶联和光交联新技术在非编码RNA研究中的应用
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    2014
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    重大研究计划
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  • 项目类别：
    面上项目

相似国自然基金

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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