PATE-B和α7 nAChR相互作用促进人精子运动的功能研究
批准号:
81300533
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
23.0 万元
负责人:
刘芙君
依托单位:
学科分类:
精子发生异常与男性不育
结题年份:
2016
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
刘新、王文娟、华秀峰、王文亭、王学波、李宁、戎成婷
中文摘要
精子成熟关键蛋白的研究一直是男性生育调控热点。我们在前期工作中首次鉴定到关键蛋白PATE-B可参与精子运动调控并与弱精症相关,结合已有报道我们推测PATE-B极有可能作为配体结合精子膜蛋白α7nAChR并激活相关信号通路进而调控精子运动。本课题将从基础研究结合临床应用的角度:①通过监测PATE-B重组蛋白、α7nAChR拮抗剂或激动剂对人精子活力和胞内相应信号分子的影响用于研究PATE-B调控精子运动的机理;②通过大样本筛查弱精症中的PATE-B并用其重组蛋白改善弱精运动指标用于评估其临床应用价值;③通过测定不同年龄组人精子样本中的PATE-B用于衡量其作为潜在精子质量评价分子的可行性。本课题通过研究PATE-B和α7nAChR相互作用促进精子运动的机制和功能,为弱精症的诊断、治疗和精子质量评价提供新的靶点和思路,具有重要的理论意义和临床应用价值。
英文摘要
Discovery of major sperm maturation-associated proteins is "hot-spots" for the male fertility research. In our previous study, we firstly confirmed that PATE-B was involved in human sperm motility and negatively associated with asthenozoospermia. Here,we hypothesize that PATE-B can enhance human sperm motility by interaction with sperm α7nAChR, and then couple the signal to further downstream signaling processes. Now,our study is geared toward the basic research project: ① Monitoring of sperm motility and expressions of major signal molecules under the different co-incubation conditions indicates the regulation mechanism of human sperm motility through interaction of PATE-B and α7nAChR. ②In asthenozoospermia, PATE-B quantification and its rescue for sperm motility were performed to evaluate its clinical value for diagnosis and treatment. ③ Quantitative analysis of PATE-B in semen of different age groups (30-70 year olds) assess its availbility as a potential target for sperm quality evaluation. Our study will clarify the regulation mechanism of human sperm motility induced by the interaction of PATE-B and α7nAChR; and provide the basis of development of diagnostic markers and therapeutic targets for infertility or targest for male contraception and sperm quality evaluation.
本研究前期工作筛选出精子成熟关键蛋白PATE-B,初步实验提示其参与精子运动调控。本课题从基础研究结合临床应用的角度,鉴定了PATE-B基因和蛋白表达谱,确定了PATE-B为附睾选择性高表达基因,其表达产物为附睾体部高表达分泌蛋白,提示其在附睾精子成熟中的潜在重要作用。Western Blot和免疫组化分析PATE-B蛋白在不同年龄人睾丸和附睾的表达变化,揭示其有随年龄增长而表达降低趋势。进一步精子荧光定量实验鉴定PATE-B在人体外精子的定位率和定位强度也随年龄增长而有降低趋势。年龄相关的动态表达变化提示PATE-B与精子质量有密切关系。人体外精子功能实验研究发现PATE-B抗体封闭体外精子抑制精子运动,并且和精卵穿透融合相关。免疫荧光定量实验鉴定不同年龄组人体外精子和弱精症患者体外精子具有相似定位变化趋势,提示其存在类似的分子基础。构建PATE-B过表达真核载体,敲减载体,以前列腺癌细胞系为模型,利用免疫共沉淀,Western Blot等手段研究PATE-B相互作用蛋白及其下游信号通路,为了解PATE-B参与精子运动等功能调控提供信息。本课题首次提出了老年人体外精子与弱精症精子具有相似的质量降低的分子基础,而PATE-B蛋白为潜在的靶标分子之一,其精子定位和定量表达在老年人体外精子和弱精症精子具有相似的表达模式。PATE-B参与精子成熟的分子功能和分子机制的研究为精子成熟关键蛋白的研究提供了重要参考,也为弱精症的诊断、治疗和精子质量评价提供新的靶点和思路,具有重要的理论意义和临床应用价值。
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Proteome profiling of the sperm maturation milieu in the rhesus monkey (Macaca mulatta) epididymis
恒河猴(Macaca mulatta)附睾精子成熟环境的蛋白质组分析
DOI:
10.1071/rd14322
发表时间:
2016-01-01
期刊:
REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT
影响因子:
1.9
作者:
[Liu, Xin, Jin, Shao-Hua, Liu, Fu-Jun]
通讯作者:
Liu, Fu-Jun
In-depth Proteomic mapping of mouse (Mus musculus) epididymal constructive basis for sperm maturation.
小鼠(小家鼠)附睾精子成熟构建基础的深入蛋白质组学图谱。
DOI:
10.1186/s12953-015-0076-3
发表时间:
2015
期刊:
Proteome science
影响因子:
2
作者:
[Liu X, Liu FJ, Jin SH, Shen XF, Wang YW]
通讯作者:
Wang YW
Screening and functional analysis of differential protein profile of human breast cancer
人乳腺癌差异蛋白谱的筛选及功能分析
DOI:
--
发表时间:
2014
期刊:
Oncol Lett
影响因子:
--
作者:
[Liu Fu-Jun, Wang Xue-Bo, Cao Ai-Guo]
通讯作者:
Cao Ai-Guo
DOI:
10.4238/2015.may.4.14
发表时间:
2015-01-01
期刊:
GENETICS AND MOLECULAR RESEARCH
影响因子:
0.4
作者:
[Liu, X. -X., Liu, F. -J.]
通讯作者:
Liu, F. -J.
Comparison of gene expression of the oncogenic Wnt/beta-catenin signaling pathway components in the mouse and human epididymis.
小鼠和人附睾中致癌 Wnt/β-catenin 信号通路成分的基因表达比较。
DOI:
--
发表时间:
2015
期刊:
Asian Journal of Andrology
影响因子:
2.9
作者:
[Wenting Wang, Yan Li, Hui Shi, Fujun Liu]
通讯作者:
Fujun Liu
共 12 条
睾丸特异性蛋白CMTM2参与精子发生、精子质量调控的功能及机制研究
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批准号:81971438
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项目类别:面上项目
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资助金额:55.0万元
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批准年份:2019
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负责人:刘芙君
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依托单位:
国内基金
海外基金