转录因子E2F-1抑制胃癌转移的研究

胃恶性肿瘤的的致命危害是其转移，本项目针对转录因子E2F-1参与调控胃癌细胞生长周期的特点：①用酵母双杂交法筛查与E2F-1相互作用的蛋白，以免疫共沉淀和激光共聚焦验证这些蛋白；②构建各种类型的E2F-1载体转染胃癌细胞株，通过间接免疫荧光、激光共聚焦等观察其对筛查到的E2F-1相互作用蛋白分子、细胞周期蛋白、细胞周期蛋白依赖性激酶以及肿瘤转移抑制基因的影响，并观察其对胃癌细胞功能的影响，阐明E2F-1的体外功能机制；③建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型，结合临床胃癌转移样本，采用激光捕获显微切割技术，选择性分离原位胃癌细胞和转移瘤细胞，以Real-Time RT-PCR检测E2F-1相关基因的变化，以免疫电镜验证E2F-1及相关蛋白在胃癌细胞内的共存情况，以透射电镜观察胃癌细胞和转移瘤细胞的的结构变化，分析其与E2F-1相关分子的表达及患者病情的相关性，阐明E2F-1在胃癌转移中的作用机制。