生物转化甘草酸的多样性及其定向合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸的机理研究

以本课题组自行筛选的、并能以不同方式转化甘草酸为单葡萄糖醛酸基甘草次酸（GAMG）或甘草次酸的三株真菌为对象（Penicillium sp. Li-3、Aspergillus sp. Li-20 和Aspergillus sp Li-62），针对三株真菌所具有的不同转化类型的β-D-葡萄糖醛酸苷酶的性质及其特殊的催化功能，克隆三种酶的基因，并构建巴氏毕赤酵母高效表达系统，研究β-D-葡萄糖醛酸苷酶的催化反应多样性。同时，针对β-D-葡萄糖醛酸苷酶在催化甘草酸生物转化过程中存在产物和基团的多样性及真菌Penicillium sp. Li-3定向合成GAMG的独特性，通过定点突变技术分析定向合成GAMG的酶基因、蛋白结构和催化功能的关系，进一步探索β-D-葡萄糖醛酸苷酶的定向催化机理和催化规律，阐明以糖苷酶为工具的糖苷类化合物定向生物转化机制，为糖苷类化合物定向生物转化提供新思路和新方法。