香鱼LECT2通过CD209样受体调控巨噬细胞参与抗菌免疫的研究

批准号:
31372555
项目类别:
面上项目
资助金额:
80.0 万元
负责人:
陈炯
依托单位:
学科分类:
C1907.水产生物免疫学
结题年份:
2017
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
陆新江、史雨红、闫茂仓、孙爱丽、王芳、何宇青、李荷香、初长青、杨旦阳
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中文摘要
LECT2是一个重要的脊椎动物细胞因子,前期研究揭示哺乳动物LECT2能激活巨噬细胞,提高细菌性败血症小鼠的存活率,鱼类LECT2与其抗菌免疫相关,但功能与作用机理尚不清楚。本项目旨在研究香鱼LECT2是否通过CD209样受体调控巨噬细胞功能,参与整体抗菌免疫能力。拟通过向细菌感染香鱼体内注射LECT2检测存活率、组织载菌量、组织病理和细胞因子表达变化,证实LECT2对香鱼整体的免疫保护作用,解明其作用机制是通过抑制早期炎症或是促进保护性免疫;通过体外细胞培养,研究LECT2处理后香鱼巨噬细胞基因表达、吞噬和杀菌能力变化,证明LECT2激活巨噬细胞功能,解明香鱼LECT2保护性免疫的细胞机理;通过RNA干扰和抗体封闭阻断巨噬细胞CD209样受体,证实CD209样受体介导LECT2激活香鱼巨噬细胞功能。通过项目实施,有望揭示LECT2在鱼类抗菌免疫反应中的保护作用机制。
英文摘要
Leukocyte cell-derived chemotaxin 2 (LECT2) is reported to be an important cytokine in vertebrate. Previous studies have shown that LECT2 could activate macrophages to improve the survival of septic mice. However, the functions of LECT2 in fish immune response remain unclear. In this study, we aim to investigate whether LECT2 protects Plecoglossus altivelis against bacterial infection by activating macrophages via the CD209-like receptor. By observing the survival, bacterial killing, tissue pathological section and cytokine expression in infected fish treated with LECT2, we will illustrate whether LECT2 effect is dependent on reducing the exaggerated inflammatory response or improving the protective immunity. By using primary cultured head kidney-derived macrophages, we will investigate the activation effect of LECT2 on macrophages including the alterations of gene expression, cytokine secretion, phagocytosis and bacterial killing to illustrate the cellular mechanism of the immune protection effect of LECT2. By using RNA interference and neutralizing antibody block techniques, we will verify that CD209-like receptor is the functional receptor of LECT2 on macrophages. This work will elaborate the protective mechanism of LECT2 on fish infected with bacteria.
LECT2是一个重要的脊椎动物细胞因子,与鱼类抗菌免疫相关,但其功能与作用机理尚不清楚。本项目首先采用鳗弧菌感染的脓毒血症香鱼模型,并研究香鱼rPaLECT2m处理对其病情的影响;结果表明,腹腔注射rPaLECT2m能显著改善脓毒血症香鱼的存活率、组织载菌量、早期细胞因子表达和组织病理变化等;利用氯膦酸二钠-脂质体法去除香鱼活体的单核/巨噬细胞(MO/MФ)后,rPaLECT2m的作用消失,揭示MO/MФ是LECT2在香鱼中的靶细胞。其次,我们转录组测序了香鱼头肾来源的MO/MФ,并制备相关基因芯片,采用芯片杂交方法筛选了rPaLECT2m处理后MO/MФ的差异表达基因;结果显示,处理后有231个基因表达上调,14个基因表达下调,这些基因主要为细胞因子及其受体等。进一步我们研究了rPaLECT2m处理对香鱼MO/MФ的活性影响, 发现rPaLECT2m处理可显著增强MO/MФ的呼吸爆发、吞噬和杀菌能力,但不影响其增殖及精氨酸酶活性。最后,采用抗体封闭的方法, 我们阐明了rPaLECT2m是通过其受体—PaCD209a介导激活香鱼MO/MФ; 研究显示,rPaLECT2m处理能显著改变静息和LPS刺激(病理)状态下MO/MФ的细胞因子表达、吞噬及杀菌能力,PaCD209a单独并不介导MO/MФ吞噬,而用anti-PaCD209a IgG封闭PaCD209a功能后,rPaLECT2m诱导的静息和病理态MO/MФ的这些炎症反应受到显著抑制,揭示PaCD209a介导了PaLECT2激活香鱼MO/MФ的过程。综上,PaLECT2可经由PaCD209a介导激活香鱼MO/MФ功能,促进脓毒血症香鱼存活;PaLECT2并不是通过抑制早期炎症反应发挥该作用,而是增强了机体的保护性免疫。本研究在国际上首次系统阐明了LECT2在鱼类细菌性感染免疫应答中的作用及机制,为后续病害的免疫调控防治奠定了理论基础。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Mobilisation and dysfunction of haematopoietic stem/progenitor cells after Listonella anguillarum infection in ayu, Plecoglossus altivelis.
香鱼、香鱼利斯顿氏菌感染后造血干/祖细胞的动员和功能障碍
DOI:10.1038/srep28082
发表时间:2016-06-16
期刊:Scientific reports
影响因子:4.6
作者:Lu XJ;Chen Q;Rong YJ;Chen J
通讯作者:Chen J
DOI:--
发表时间:2017
期刊:海洋与湖沼
影响因子:--
作者:陈梦丹;朱凯;徐铸婕;李长红;苗亮;陈炯
通讯作者:陈炯
Molecular Characterization of E-Type Prostanoid Receptor 4 (EP4) from Ayu (Plecoglossus altivelis) and Its Functional Analysis in the Monocytes/Macrophages.
香鱼 E 型前列腺素受体 4 (EP4) 的分子特征及其在单核细胞/巨噬细胞中的功能分析
DOI:10.1371/journal.pone.0147884
发表时间:2016
期刊:PloS one
影响因子:3.7
作者:Rong YJ;Lu XJ;Chen J
通讯作者:Chen J
Interplay between the gut microbiota and immune responses of ayu (Plecoglossus altivelis) during Vibrio anguillarum infection
鳗弧菌感染期间肠道菌群与香鱼(Plecoglossus altivelis)免疫反应之间的相互作用
DOI:10.1016/j.fsi.2017.07.054
发表时间:2017-09
期刊:Fish & Shellfish Immunology
影响因子:4.7
作者:Nie L;Zhou QJ;Qiao Y;Chen J
通讯作者:Chen J
Molecular characterization of a CXCL8-like protein from ayu and its effect on chemotaxis of neutrophils and monocytes/macrophages
香鱼CXCL8样蛋白的分子特征及其对中性粒细胞和单核细胞/巨噬细胞趋化性的影响
DOI:10.1016/j.gene.2014.07.006
发表时间:2014-09-10
期刊:GENE
影响因子:3.5
作者:Chu, Chang-Qing;Lu, Xin-Jiang;Chen, Jiong
通讯作者:Chen, Jiong
动态棕榈酰化修饰调控大黄鱼NLRP3炎性小体活化的机制研究
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:50万元
- 批准年份:2024
- 负责人:陈炯
- 依托单位:
大弹涂鱼CD40作为MOSPD2共受体调控LEAP2趋化单核巨噬细胞的分子机制
- 批准号:LZ23C190001
- 项目类别:省市级项目
- 资助金额:0.0万元
- 批准年份:2023
- 负责人:陈炯
- 依托单位:
大弹涂鱼MOSPD2在介导LEAP2调控单核巨噬细胞功能中的内吞入胞和胞内“脚手架”作用机制
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:58万元
- 批准年份:2021
- 负责人:陈炯
- 依托单位:
香鱼CXCR4a和CXCR4b协同调控造血干/祖细胞增殖、动员和活性的研究
- 批准号:31972821
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:58.0万元
- 批准年份:2019
- 负责人:陈炯
- 依托单位:
香鱼LECT2诱导头肾造血干/祖细胞动员的机制
- 批准号:31772876
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:25.0万元
- 批准年份:2017
- 负责人:陈炯
- 依托单位:
国内基金
海外基金
