猪胸膜肺炎放线杆菌血清型特异的疫苗候选基因筛选

猪传染性胸膜肺炎是全球性严重危害养猪业的呼吸道疾病,胸膜肺炎放线杆菌（APP）是该病的病原体。迄今已发现APP 15个血清型，主要血清型间没有交叉免疫保护，导致疫苗研究进展十分缓慢，寻找不同血清型特异的保护性基因，成为研制多价疫苗的一个瓶颈。本课题拟以APP国内主要血清型1型和3型强毒参考株为研究对象，采用代表性差异分析（RDA）技术，构建差减基因文库，找出主要血清型间差异表达基因，将其构建核糖体展示文库，经免疫筛选和RT-PCR扩增、克隆测序、核酸杂交、定量PCR验证，筛选出APP血清1与3型特异的抗原基因。与本人已完成的1与5型特异抗原基因比较，结合internet基因库检索和蛋白结构、功能预测，确定1型和3型特异的潜在疫苗候选基因。为今后新型多价疫苗研究以及特异性分子诊断技术的建立提供必要的基因基础，并提供系统筛选候选抗原基因的良好平台。