河蟹螺原体和非凡螺原体对脊椎动物嗜神经感染机制的研究
批准号:
31170120
项目类别:
面上项目
资助金额:
63.0 万元
负责人:
王文
依托单位:
学科分类:
C0108.病原细菌学
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
孟庆国、顾伟、欧江涛、李文杰、丁正峰、杜婕、吉红、姚伟、修云吉
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中文摘要
根据河蟹螺原体和非凡螺原体能侵染脊椎动物(鸡胚和新生小鼠)并表现出嗜神经感染特征,利用河蟹螺原体和非凡螺原体基因组信息以及鸡和小鼠基因组信息,从体外培养、组织水平、细胞和分子水平上开展两种螺原体对脊椎动物嗜神经感染机制的研究和比较。建立感染动物模型并用免疫组化和电镜技术观察螺原体对寄主的侵染特点;利用与寄主磷脂代谢及免疫相关基因定制芯片,检测寄主感染螺原体后相应基因的差异表达,并用实时定量PCR方法验证;运用液质联用技术探讨螺原体感染后对寄主蛋白表达的影响;用Far-western blotting和GST Pull down技术进行螺原体与寄主神经类细胞互作蛋白的筛选与鉴定;用电镜、差异荧光双向电泳和质谱技术检测不同磷脂含量培养下螺原体的生长、形态和蛋白表达的变化,筛选与磷脂代谢相关的蛋白。综上研究,揭示河蟹螺原体和非凡螺原体对脊椎动物嗜神经感染机制,探讨水生螺原体与陆生螺原体的关联。
英文摘要
证实河蟹螺原体能够感染乳鼠产生白内障,并建立了相关动物模型,同时还建立了小鼠胚胎成纤维细胞(3T6)和小鼠晶状体上皮细胞(MLEC)的螺原体感染模型,并在此基础上开展了表达谱芯片筛选及互作蛋白的筛选。通过表达谱芯片筛出437个上调基因和183个下调基因,同时还用microRNA芯片筛选到22个差异表达的micrRNA,对所筛选出的靶基因进行预测,然后将靶基因与表达谱芯片的结果进行联合分析,发现这些基因在新陈代谢通路、MAPK通路和粘附通路有大量存在,此两条通路与螺原体感染关系密切。针对联合分析的靶基因,采用Realtime-PCR和Western Blot的方法进行验证,最终得出:ERK通路在螺原体感染过程中起到重要的作用。此外,在开展螺原体与宿主细胞互作蛋白筛选中,利用从罗氏沼虾血淋巴细胞感染螺原体后筛选到的相关配体蛋白信息,在3T6细胞上进行验证,证实配体蛋白烯醇化酶在螺原体侵染小鼠3T6过程中也起到重要作用。螺原体体外不同磷脂含量培养条件下的比较实验显示,在胆固醇组和脑磷脂组中螺原体都聚集成团,而对照没有,表明螺原体在有脂类物质和无脂类物质环境下有不同反应。为了进一步探讨螺原体对磷脂类物质的反应方式,本项目应用毛细管实验和显微镜观察装片实验开展了河蟹螺原体趋化性研究,发现河蟹螺原体对卵磷脂(PC),甲硫氨酸(Met),葡萄糖(Glc)等物质都喜好,其中对卵磷脂(PC)趋化作用最强,这一实验结果很好地解释了为什么河蟹螺原体对富含卵磷脂的组织(如虾蟹中枢神经、结缔组织等,乳鼠的脑部及视神经等)具有特异性的侵染,从而造成虾蟹附肢颤抖及小鼠白内障等病症。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
A novel Toll like receptor with two TIR domains (HcToll-2) is involved in Cross Mark regulation of antimicrobial peptide gene expression of Hyriopsis cumingii
具有两个 TIR 结构域的新型 Toll 样受体 (HcToll-2) 参与三角帆蚌抗菌肽基因表达的交叉标记调控
DOI:10.1016/j.dci.2014.02.020
发表时间:2014-07-01
期刊:DEVELOPMENTAL AND COMPARATIVE IMMUNOLOGY
影响因子:2.9
作者:Ren, Qian;Lan, Jiang-Feng;Wang, Jin-Xing
通讯作者:Wang, Jin-Xing
Transcriptome-wide identification and characterization of the Procambarus clarkii microRNAs potentially related to immunity against Spiroplasma eriocheiris infection
克氏原螯虾 microRNA 的全转录组鉴定和表征,可能与针对 Eriocheiris 螺原体感染的免疫相关。
DOI:10.1016/j.fsi.2013.05.013
发表时间:2013-08-01
期刊:FISH & SHELLFISH IMMUNOLOGY
影响因子:4.7
作者:Ou, Jiangtao;Li, Yue;Wang, Wen
通讯作者:Wang, Wen
Identification of a novel cognate cytosolic Hsp70 gene (MnHsc70-2) from oriental river prawn Macrobrachium nipponense and comparison of its expressions with the first cognate Hsc70 (MnHsc70-1) under different stresses
日本沼虾新型同源胞质 Hsp70 基因 (MnHsc70-2) 的鉴定及其与第一个同源 Hsc70 (MnHsc70-1) 在不同胁迫下的表达比较
DOI:10.1007/s12192-014-0519-2
发表时间:2014-05
期刊:Cell Stress Chaperones
影响因子:--
作者:Ren Qian;Gu Wei;Meng Qingguo;Wang, Wen
通讯作者:Wang, Wen
DOI:--
发表时间:2012
期刊:淡水渔业
影响因子:--
作者:黄艳青;靳明建;顾伟;王文
通讯作者:王文
DOI:--
发表时间:2012
期刊:南京师大学报(自然科学版)
影响因子:--
作者:靳明建;顾伟;王文;Meng Qingguo1,Huang Yanqing2,Jin Mingjian3,Gu Wei1,Wang Wen1(
通讯作者:Meng Qingguo1,Huang Yanqing2,Jin Mingjian3,Gu Wei1,Wang Wen1(
类肌动蛋白MreB在河蟹螺原体形态变化、运动及致病中的功能解析
- 批准号:31870168
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:59.0万元
- 批准年份:2018
- 负责人:王文
- 依托单位:
中华绒螯蟹血细胞microRNAs在螺原体感染中的免疫调控功能研究
- 批准号:31272686
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:80.0万元
- 批准年份:2012
- 负责人:王文
- 依托单位:
水生甲壳动物新型病原微生物- - 螺原体几种重要功能基因的筛选和研究
- 批准号:30870090
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:30.0万元
- 批准年份:2008
- 负责人:王文
- 依托单位:
虾蟹新型病原- - 螺原体的系统分类和致病机理研究
- 批准号:30771649
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:30.0万元
- 批准年份:2007
- 负责人:王文
- 依托单位:
中华绒螯蟹颤抖病病原体生物学特性及传播途径的研究
- 批准号:30371118
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:19.5万元
- 批准年份:2003
- 负责人:王文
- 依托单位:
国内基金
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