Raf激酶抑制蛋白表达下调/缺失促鼻咽癌转移的作用及其机制研究

我们前期的鼻咽癌(NPC)比较蛋白质组学研究结果发现：Raf 激酶抑制蛋白(RKIP)表达下调/缺失与NPC侵袭转移密切相关，可能是NPC的转移抑制蛋白，但RKIP表达下调/缺失促进NPC侵袭转移的作用及其机制需要进一步阐明。为此，本项目开展RKIP表达下调/缺失促进NPC侵袭转移的作用及其机制研究。主要结果如下：(1)建立了RKIP表达上调的5-8F NPC细胞系以及RKIP表达下调的6-10B NPC细胞系；(2)上调RKIP表达水平能降低5-8F细胞的体外迁移、侵袭、黏附和降解细胞外基质的能力，下调RKIP表达水平能增加6-10B细胞的体外迁移和侵袭能力；(3)裸鼠尾静脉注射癌细胞分析RKIP表达改变对NPC细胞体内转移的影响。结果显示，上调RKIP表达降低5-8F细胞转移到肺脏的能力，下调RKIP表达增强6-10B细胞转移到肺脏的能力；(4)以建立的RKIP表达改变的NPC细胞系为样本，分析RKIP表达改变对Raf-1/MEK/ERK和NF-kappaB信号通路活性的影响及其与NPC细胞侵袭转移的关系。结果显示，上调RKIP表达抑制5-8F细胞Raf-1/MEK/ERK和NF-kappaB信号通路的活性，下调RKIP表达增加6-10B细胞Raf-1/MEK/ERK和NF-kappaB信号通路的活性，即RKIP表达水平与NPC细胞Raf-1/MEK/ERK和NF-kappaB信号通路的活性负相关；另外，RKIP表达下调可通过活化Raf-1/MEK/ERK和NF-kappaB两条信号通路增加6-10B鼻咽癌细胞的体外侵袭能力；(5)以建立的RKIP表达上调的5-8F NPC细胞系为样本，采用靶向蛋白质组学方法(抗RKIP抗体免疫共沉淀结合质谱分析)分离、鉴定RKIP的互作蛋白质，共鉴定了25个RKIP的互作蛋白质，为进一步研究RKIP的作用机制奠定了基础。. 本项目研究结果表明，RKIP表达下调/缺失促进NPC的侵袭和转移；RKIP表达下调/缺失通过激活Raf-1/MEK/ERK和NF-kappaB两条信号通路促进NPC的侵袭和转移；RKIP是潜在的NPC转移抑制蛋白。