课题基金基金详情
SKA1基因在骨肉瘤原发耐药中的作用机制研究
结题报告
批准号:
81172105
项目类别:
面上项目
资助金额:
60.0 万元
负责人:
沈赞
依托单位:
学科分类:
H1821.肿瘤治疗抵抗
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
姚阳、李洪涛、汤丽娜、余文熙、熊桑、杜雪菲
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
骨肉瘤的恶性程度高,预后差。化疗原发耐药阻碍其疗效提高,由于缺乏合适的研究模型,原发耐药相关研究进展甚微。.我们对19例新鲜活检标本原代培养并传代成株,发现了具备原发耐药特性的SF-86和化疗敏感的NC-04细胞株,并建立了原发耐药骨肉瘤裸鼠模型(专利号:201010110746X)。.通过对SF-86和NC-04细胞进行全基因组表达谱基因芯片对照分析,初步筛选出50个潜在的原发耐药相关分子,随后建立shRNA慢病毒RNAi文库进行功能验证,发现SKA1基因显著影响SF-86细胞对多种化疗药物的耐药功能,提示SKA1基因在骨肉瘤原发耐药中起重要作用,而目前未见相关报道。.本项目拟深入研究SKA1基因抑制后下游基因转录、通路蛋白表达的改变,明确SKA1显著调控的信号通路与下游靶分子,利用GST pulldown技术联合质谱鉴定SKA1相互作用的蛋白,从而阐明其发挥耐药功能的分子机制。
英文摘要
骨肉瘤的恶性程度高,预后差。化疗原发耐药阻碍其疗效提高,由于缺乏合适的研究模型,原发耐药相关研究进展甚微。.我们对19例新鲜活检标本原代培养并传代成株,发现了具备原发耐药特性的SF-86和化疗敏感的NC-04细胞株,并建立了原发耐药骨肉瘤裸鼠模型(专利号:201010110746X)。.通过对SF-86和NC-04细胞进行全基因组表达谱基因芯片对照分析,初步筛选出50个潜在的原发耐药相关分子,随后建立shRNA慢病毒RNAi文库进行功能验证,发现SKA1基因显著影响SF-86细胞对多种化疗药物的耐药功能,提示SKA1基因在骨肉瘤原发耐药中起重要作用,而目前未见相关报道。.本项目观察了SKA1基因稳定沉默的SF-86,U2OS和Saos-2细胞株的耐药变化,发现SKA1基因稳定沉默后,SF-86细胞的耐药性明显消失,恢复了对MTX,DDP和ADM的敏感性,而U2OS及Saos-2的药物敏感性也有一定的增加。同时,SKA1基因稳定沉默后,SF-86,U2OS及Saos-2细胞株的增殖和侵袭力都显著降低。酵母双杂交实验发现SKA1基因能够和转录复合体II的亚单位RPB3结合。随后我们进行了免疫共沉淀实验进一步验证,发现在SF-86细胞中,SKA1基因确实能够和转录复合体II的亚单位RPB3发生内源性结合。我们再用染色体免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)的方法,深入研究SKA1、RPB3和FBGS基因之间的关系。发现,MTX治疗时,RPB3蛋白能够结合到FPGS基因的启动子区域,而高表达SKA1基因时这种结合被抑制;而SKA1蛋白本身并不能结合到FPGS基因的启动子区域,这说明,MTX的原发耐药机制在于,SKA1基因高表达时,抑制了RPB3和FPGS基因的启动子区域的结合,从而抑制了MTX作用于细胞时,细胞应该启动的FPGS表达增加,因此不能合成能够滞留在细胞内的MTXPG,细胞内的MTX浓度无法达到有效地杀伤浓度水平。至此,本项目基本阐明SKA1基因在MTX原发耐药中的作用及其分子机制。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Zhou XH, Tang LN, Yue L, Min DL, Yang Y, Huang JA, Shen Z. HGFK1 is associated with a better prognostis and reverses inhibition by gefitinib in NSCLC cases.Asian Pac J Cancer Prev. 2012;13(4):1457-61.
Zhou XH,Tang LN,Yue L,Min DL,Yang Y,Huang JA,Shen Z。HGFK1与NSCLC病例中更好的预后相关并逆转吉非替尼的抑制。亚洲太平洋癌症预防杂志。
DOI:--
发表时间:2012
期刊:Asian Pac J Cancer Prev.
影响因子:--
作者:周晓辉;沈赞
通讯作者:沈赞
Yao Y, Fang ZP, Chen H, Yue L, Min DL, Tang LN, Yu WX, Kung HF, Lin MC, Shen Z.Cancer Gene Ther. 2012 Sep;19(9):601-8.
姚Y,方ZP,陈H,岳L,敏DL,唐LN,于WX,Kung HF,林MC,沉Z.癌症基因治疗。
DOI:--
发表时间:2012
期刊:Cancer Gene Therapy
影响因子:6.4
作者:余文熙;孔祥福;林李家宓;沈赞
通讯作者:沈赞
MYC Protein Inhibits Transcription of the MicroRNA Cluster MC-let-7a-1 similar to let-7d via Noncanonical E-box
MYC 蛋白通过非规范 E-box 抑制 MicroRNA 簇 MC-let-7a-1 的转录,类似于 let-7d
DOI:--
发表时间:2011
期刊:Journal of Biological Chemistry
影响因子:4.8
作者:Chan, Danny Tat-Ming;Poon, Wai Sang;Kung, Hsiang-fu;Lin, Marie Chia-mi
通讯作者:Lin, Marie Chia-mi
The Prognostic Role of Ezrin Immunoexpression in Osteosarcoma: A Meta-Analysis of Published Data.
Ezrin 免疫表达在骨肉瘤中的预后作用:已发表数据的荟萃分析
DOI:10.1371/journal.pone.0064513
发表时间:2013
期刊:PloS one
影响因子:3.7
作者:Li H;Min D;Zhao H;Wang Z;Qi W;Zheng S;Tang L;He A;Sun Y;Yao Y;Shen Z
通讯作者:Shen Z
DOI:10.3892/ijo.2014.2295
发表时间:2014-04
期刊:International journal of oncology
影响因子:5.2
作者:Yu W;Tang L;Lin F;Li D;Wang J;Yang Y;Shen Z
通讯作者:Shen Z
DGKZ-ERK1/2-MYC信号通路在促进骨肉瘤复发转移中的作用机制研究
  • 批准号:
    81972521
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    沈赞
  • 依托单位:
vastatin/JAG2/Pck1信号通路在骨肉瘤转移中的抑制作用及其机制研究
  • 批准号:
    81672658
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    53.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    沈赞
  • 依托单位:
AAV-HGFK1联合Adv-p53在抑制乳腺癌骨转移中的作用机制研究
  • 批准号:
    30872991
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    31.0万元
  • 批准年份:
    2008
  • 负责人:
    沈赞
  • 依托单位:
国内基金
海外基金