变异链球菌粘附相关小RNA与龋易感性的关系及功能分析
结题报告
批准号:
81570967
项目类别:
面上项目
资助金额:
57.0 万元
负责人:
林焕彩
依托单位:
学科分类:
H1503.牙体牙髓及根尖周组织疾病
结题年份:
2019
批准年份:
2015
项目状态:
已结题
项目参与者:
周燕、刘佳、陶冶、刘姗姗、朱文慧、庄沛林、庞亮月
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
变异链球菌(变链菌)是目前公认的主要致龋菌,其对牙面的粘附是发挥致龋作用的首要条件。研究表明细菌粘附相关毒力因子的表达受细菌体内小RNA(small RNAs, sRNAs) 的调控,但sRNAs在变链菌的研究刚刚开始,其在变链菌粘附作用中的角色尚未见报道。本课题拟在不同粘附条件下对变链菌UA159的sRNAs建库、测序及筛查差异性表达的sRNAs,并应用Northern blot及RT-qPCR技术进一步鉴定。检测差异性表达sRNAs在有龋和无龋幼儿牙菌斑变链菌临床株的表达水平,结合流行病学调查资料,分析其与龋易感性的关系。预测相应靶mRNA,生物合成sRNAs后探讨龋易感性sRNAs对靶mRNA的调控作用。从转录后水平探讨变链菌的粘附机制,为寻找龋病预测及预防的新靶标提供实验依据。
英文摘要
Abstract: Streptococcus mutans (S. mutans) has been considered as a primary causative agent of dental caries. Their adhesion to the surface of the teeth is the prerequisite for cariogenecity. Previous studies have shown that virulence factors associated with adhesion is regulated by small RNAs (sRNAs) in bacteria. However, the study on sRNAs of S. mutans is just begining, and whether sRNAs play a role in the adhesion process of S. mutans has not been reported. This proposed project set out to address this question by constructing sRNAs libraries under various adhesion conditions in S. mutans UA159. The sRNAs showed significantly differential expression level among the various adhesion conditions will be screened out and further confirmed by Northern blot and RT-qPCR. Moreover, the relationship between differential expression sRNAs and caries susceptibility will be analyzed combining the expression of these sRNAs in children suffered from dental caries and caries free with epidemiology survey data. Furthermore, the regulatory of sRNA on target mRNAs will be explored after the prediction of target mRNAs and the biosynthesis of sRNAs. Taken together, our study not only reveal the adhesion mechanisms of S. mutans at post-transcription level, but also facilitate discovering future targets for the prediction and prevention of dental caries.
细菌小RNA在细菌的致病性和环境适应性中发挥重要作用。变异链球菌(变链菌)是目前公认的主要致龋菌。通过在不同致龋压力(酸性压力,不同蔗糖及葡萄糖浓度压力)下构建变链菌标准株UA159的小RNA文库,并结合测序和生物信息学分析结果,发现变异链球菌在不同压力和环境诱导下均可产生一定数量的sRNAs,其中部分sRNAs是受特异压力诱导产生的,变异链球菌中可能存在复杂的sRNAs调控网络。低pH环境是导致龋病发生的直接条件,我们继而在变异链球菌临床株中验证酸性压力诱导下的小RNA的表达改变与预测靶基因的关系,结果发现sRNA133474的表达在不同pH条件下和不同耐酸能力的临床株中的差异倍数最大,其中sRNA133474与预测靶基因liaR, ciaR和covR的表达呈负相关。变异链球菌对牙面的粘附能力是其发挥后续致龋性的先决条件,我们在不同粘附条件(1% 蔗糖和无蔗糖)下对变异链球菌 UA159 的 sRNAs进行建库测序,结合信息学分析(GO、KEGG及靶基因预测)、临床株生物学表型与小RNA表达水平相关性分析结果,发现sRNA0187和sRNA0593的表达在高粘附能力和低粘附能力的临床菌株中具有显著性差异变化,其中sRNA0593可能通过正调控vicR、gbpB、gtfB、gtfC、gbpC及gtfD促进变异链球菌的粘附,而sRNA0187可能通过负调控vicR、gbpB、gtfB、gtfC及gbpC而抑制变异链球菌的粘附。考虑到龋病是以细菌感染为主的多因素疾病,我们采用流行病学的方法,结合龋危险因素,评估变异链球菌临床株中sRNA0187和sRNA0593在龋病发生中的作用,发现sRNA0187的低水平表达与乳牙龋易感性相关。本研究不仅开阔了变异链球菌的致龋机制研究的视野,也为寻找龋病预测及预防的新靶标提供了一定的依据。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Effect of Different Glucose Concentrations on Small RNA Levels and Adherence of Streptococcus mutans
不同葡萄糖浓度对变形链球菌小RNA水平和粘附的影响
DOI:10.1007/s00284-019-01745-1
发表时间:2019-08
期刊:Current Microbiology
影响因子:2.6
作者:Liu Shanshan;Zhou Yan;Tao Ye;Zhuang Peilin;Pang Liangyue;Zhi Qinghui;Lin Huancai
通讯作者:Lin Huancai
DOI:10.1099/jmm.0.000718
发表时间:2018-05
期刊:Journal of medical microbiology
影响因子:3
作者:Zhu W;Liu S;Liu J;Zhou Y;Lin H
通讯作者:Lin H
Analysis of Small RNAs in Streptococcus mutans under Acid Stress-A New Insight for Caries Research.
酸性胁迫下变形链球菌中的小 RNA 分析为龋齿研究提供新见解
DOI:10.3390/ijms17091529
发表时间:2016-09-14
期刊:International journal of molecular sciences
影响因子:5.6
作者:Liu S;Tao Y;Yu L;Zhuang P;Zhi Q;Zhou Y;Lin H
通讯作者:Lin H
Characterization of acid-tolerance-associated small RNAs in clinical isolates of Streptococcus mutans: Potential biomarkers for caries prevention
变形链球菌临床分离株中耐酸相关小 RNA 的表征:预防龋齿的潜在生物标志物
DOI:10.3892/mmr.2017.7751
发表时间:2017
期刊:Molecular Medicine Reports
影响因子:3.4
作者:Zhu Wenhui;Liu Shanshan;Zhuang Peilin;Liu Jia;Wang Yan;Lin Huancai
通讯作者:Lin Huancai
DOI:10.1007/s00253-017-8346-x
发表时间:2017-07-01
期刊:APPLIED MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY
影响因子:5
作者:Liu, Shan Shan;Zhu, Wen Hui;Lin, Huan Cai
通讯作者:Lin, Huan Cai
Pac蛋白C123段来源的淀粉样六肽抑制变异链球菌生物膜形成的机制研究
  • 批准号:
    81970928
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    林焕彩
  • 依托单位:
变异链球菌srtA基因多态性与S-ECC易感性关系的分子流行病学研究
  • 批准号:
    81271123
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    70.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    林焕彩
  • 依托单位:
运用Life-course方法纵向研究婴幼儿龋发病危险因素
  • 批准号:
    30872875
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    25.0万元
  • 批准年份:
    2008
  • 负责人:
    林焕彩
  • 依托单位:
国内基金
海外基金