IRS家族在雌激素诱导骨重建过程中的作用模式与机制研究

IRS家族在骨重建及成、破骨细胞间的偶联中发挥重要作用。我们的研究首次发现：雌激素能上调IRS-2 的表达及磷酸化，确定了成骨细胞上IRS家族的表达谱。本课题在前期研究基础上，先构建去卵巢大鼠骨质疏松模型并经雌激素治疗，观察大鼠骨组织在雌激素缺乏与维持状态下IRS表达的时空特异性，及它们与骨密度、单位面积骨吸收与骨形成的关系；再利用体外培养的前成骨样细胞,在雌激素作用下经增殖、基质成熟、基质矿化过程来模拟体内骨形成到骨矿化的全过程；为观察这一过程中破骨细胞的变化，我们采用成骨、破骨细胞三维培养，使成骨、破骨细胞既分开又处于同一培养体系中。然后检测在IRS分子表达缺失状态下，雌激素诱导前后成骨细胞功能的改变及处于同一培养体系中的破骨细胞形态与功能的变化，最后通过双色荧光共定位及抗体阻滞法来研究雌激素对成骨细胞IRS分子调控的两条可能通路，确定雌激素通过何种途径来调节成骨细胞IRS分子的表达。