ihpRNA介导番木瓜环斑病毒抗性及其防卫反应调控因子的VIGS研究

植物体天然的RNAi系统不能完全抵御某种病毒侵染, 如果将病毒的某一序列设计成双链结构，强化植物体内天然的RNAi抗病毒机制，就有可能获得较高抗性的转基因植株。番木瓜环斑病毒病是阻碍番木瓜生产的严重病毒病害，而传统的方法很难在抗病育种上有所突破。本研究旨在采用融合PCR技术，建立一种高效、快捷地构建ihpRNA载体的新方法，并通过不同长度的反向重复序列和不同类型的内含子插入的比较试验以及与pHELLSGATE载体的比较，筛选具有高效沉默效率的ihpRNA表达载体，为分子生物学手段解决番木瓜环斑病毒抗性问题提供依据；RAR1与SGT1是重要的防卫反应的信号元件，介导R蛋白的防卫反应。本课题希望克隆几种防卫反应类似基因，并利用病毒介导的基因沉默技术(VIGS) 快速沉默基因和分析植物基因功能，研究番木瓜中主要的防卫反应的调控因子与PRSV抗性的关系，为开创广谱性的抗病途径提供实验证据。