失血性休克(HS)因其诱导血管收缩、增加微血管通透性及细胞凋亡等往往引起肺、肾等多器官功能不全。新鲜冰冻血浆（FFP）能大幅度地提高疗效。前期发现FFP复苏能抑制缺氧诱导人肺微血管内皮细胞及HS鼠肾血管通透性及凋亡，提示FFP可能参与降低HS导致血管高通透性和细胞凋亡，修复内皮屏障、维护其功能完整过程，然而机制不清楚。项目以腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)为切入点，利用人肺微血管内皮细胞和HS小鼠等模型，下调HS小鼠中AMPKα1活性，检测FFP复苏后小鼠肾、肺等主要脏器血管通透性、细胞凋亡及相关蛋白表达，结果显示FFP复苏降低HS小鼠肺血管通透性，减少HS鼠肾血管内皮细胞的凋亡，下调AMPKa活性后肺血管通透性增加，连接蛋白表达降低，肾血管内皮细胞的凋亡增加，凋亡相关酶Caspase-3蛋白裂解片段增多且这些与AMPKα1磷酸化有关。表明AMPKa在这一过程中发挥重要作用。为进一步确定AMPKα1特异性位点磷酸化在FFP内皮细胞保护中的作用， 将含有AMPKα1特异性位点磷酸化质粒转染细胞，结果发现恢复AMPKα1活性能显著提高FFP降低缺氧/再复氧诱导其通透性及凋亡，说明AMPKα1特异性位点磷酸化介导FFP内皮细胞保护作用。为证实FFP中激活AMPKα1关键因子脂联素参与FFP内皮细胞保护作用。分别采用FFP或脂联素抗体亲和层析柱耗竭脂联素的FFP或向耗竭脂联素又重新添加人工合成脂联素FFP复苏，检测休克后各组小鼠肺等组织中AMPKα1活性、血管通透性、细胞凋亡及相关蛋白表达， 结果发现FFP中脂联素是激活AMPKα1参与内皮细胞的保护关键因子。另外下调AMPKα1活性，发现FFP复苏HS小鼠肾或肺组织或内皮细胞Sirt1表达降低，而抑制Sirt1却可降低AMPKα1磷酸化，削弱FFP复苏抑制细胞通透性。说明AMPKα1与Sirt1之间相互调节介导FFP内皮细胞保护作用。同样发现HS可导致小鼠肺组织AMPKα1和FoxO1两蛋白磷酸化下调，FFP复苏却能逆转。进一步发现这些与FFP能活化胞内FoxO1磷酸化，FoxO1 出核增加及FoxO1从其DNA结合转录区分离，导致FoxO1转录活性降低，下调AMPKα1活性可阻碍FFP上述作用， 表明FFP可通过激活AMPKα1增加FoxO1磷酸化降低其转录活性抑制内皮细胞通透性参与内皮细胞保护功能。