生物磁分离与荧光定量连续流动PCR集成的微流控技术在核酸分析中的应用研究

本项目将生物磁分离技术与荧光定量连续流动PCR技术有机集成在单一的微流控装置上，以便减少手工操作步骤、进一步提高核酸分析速度。采用微阀将连续流动PCR与细胞热溶解以及反转录（RT）连接起来，因此该微流控装置不仅能进行常规PCR，而且能进行RT-PCR，这样的结合增强了微流控核酸分析的灵活性。具有较宽线性范围的LIF检测器用来在线检测连续流动PCR产物，从而减少或无需要PCR产物的脱线下游检测。在该微流控装置上，研究电磁铁、永磁铁及其场强大小，试样的流动速度，微通道的结构、尺寸，磁珠的粒径大小和表面特性等因素对微流控生物磁分离的影响。以三种待处理样品（登革2病毒、人全血样品以及E.coli K12溶菌液）为例，研究该集成化的微流控装置在核酸分析中的应用。此外，该项目还对目标生物体的洗脱回收、微流控生物磁分离与连续流动PCR的接口等问题进行初步的探讨研究。