成骨肉瘤细胞stathmin基因过表达的转录调控机理研究

课题组前期实验结果显示，stathmin基因过表达与成骨肉瘤发生、发展及化疗耐药密切相关。然而其过表达机理至今未阐明，本课题拟结合stathmin基因表达调控研究现状，分离并鉴定stathmin基因5＇端核心启动子顺式作用元件，分别在携带野生及突变抑癌基因的成骨肉瘤细胞中，应用凝胶阻滞、染色质免疫沉淀、位点突变实验及RNA干涉技术等，全面分析该启动子上各顺式作用元件与其相应各种转录调控因子作用关系(E2Fs，NF-Y，SP1，EGR-1)及对stathmin基因表达水平影响。明确SP1及EGR-1在stathmin基因表达调控中的作用，阐明E2Fs及NF-Y在抑癌基因p53及pRB不同功能状态下对成骨肉瘤细胞stathmin基因的表达调控作用，揭示stathmin基因过表达的转录调控机理，为探索stathmin基因转录调控在骨肉瘤发生、发展及耐药方面的效应机制奠定理论基础。