IL-6/Stat3通路下调口腔扁平苔藓CD4+CD25+Treg功能及机制研究
批准号:
81570975
项目类别:
面上项目
资助金额:
57.0 万元
负责人:
唐国瑶
依托单位:
学科分类:
H1504.牙周及口腔黏膜疾病
结题年份:
2019
批准年份:
2015
项目状态:
已结题
项目参与者:
周永梅、王宇峰、姚辉、周磊磊、陈俊俊、王燕妮
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中文摘要
口腔扁平苔藓是一种T细胞介导的自身免疫性疾病,CD4+CD25+调节性T细胞在机体免疫稳态的维持中发挥了重要作用。以往研究证明,OLP患者中该群细胞比例增高,且对效应T细胞增殖的抑制作用显著降低,然而其具体机制尚未阐明。IL-6/Stat3可参与下调Treg的功能,且已有研究证实OLP患者中IL-6较正常对照显著增高。本研究拟采用流式细胞术、ELISA,RT-PCR、磁珠分选、细胞共培养,分子生物学技术和方法就OLP患者Treg调节功能下降的机制进行以下研究:①OLP患者Treg的数量和表型,T细胞IL-6R的表达;②OLP患者Treg的体外抑制功能;③OLP血清和细胞培养上清中相关细胞因子水平;④IL-6对OLP患者Treg体外抑制功能的影响和机制;⑤IL-6对T细胞转录因子Stat3磷酸化的影响。
英文摘要
Oral lichen planus is a T cell-mediated autoimmune disease, CD4+CD25+ regulatory T cells plays a critical role in the maintenance of immune homeostasis and prevention of autoimmunity. Past studies have demonstrated that the proportion of CD4+CD25+ T cells in OLP patients was significant higher than that in healthy controls, and the inhibition function of CD4+CD25+T cells cells to CD4+CD25- T cells proliferation was impaired. Nevertheless, the specific mechanism and how the impaired immunomodulation of CD4+CD25+ Treg cells contributes to the OLP pathogenesis remains largely unknown. IL-6 in OLP patients serum was significantly higher than healthy controls, and the existing research confirmed that IL-6/Stat3 contributes to impaired function of regulatory T cell.In this study, we intend to utlize flow cytometry and ELISA, RT-PCR, magnetic bead separation, cell coculture, molecular biology techniques to explore whether there is intrinsic defect or secondary dysfunction of CD4+CD25+regulatory T cells in the following aspects: (1) The number of CD4 + CD25 + T cells in peripheral blood and phenotype; (2) OLP CD4 + CD25 + T cells in vitro inhibitory function; (3) Related cytokines in serum and cell culture supernatant level; (4) IL-6 involved CD4 + CD25 + T cells in vitro inhibitory function; (5) IL-6-mediated phosphorylation of Stat3 in T cells.
口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是本专科常见的慢性免疫相关性疾病,且目前临床缺乏根本有效的治疗方法。近年来研究发现,调节性T细胞(regulatory T cells, Treg)细胞功能异常可能是OLP重要发病机制之一。本项目实验结果显示:OLP患者外周血中Treg数量占比升高且Foxp3表达增加,但患者Treg的功能存在受损:抑制性细胞因子TGF-β的转录和分泌均减少,其对效应T细胞增殖的抑制能力较健康人明显下降。本项目进一步深入到功能研究,以寻找OLP患者Treg细胞功能受损的原因。首先,通过ELISA方法发现,与健康对照人群比较,OLP患者唾液中IL-6的含量与OLP疾病严重程度存在明显正相关,且外周血IL-6含量升高;其次,利用流式细胞术和q-PCR技术验证了,与健康对照人群比较,OLP患者外周血中Treg细胞表面高表达IL-6R,且损害部位角质形成细胞IL-6转录升高;再次,本项目建立了OLP患者Treg/效应T细胞与健康人Treg/效应T细胞的交叉培养体系,验证了OLP患者Treg功能受损,而排除了效应T细胞对Treg细胞的敏感性下降;最后,以重组人IL-6处理OLP患者Treg细胞,发现其抑制功能进一步下降;而中和上清中IL-6后,其抑制率升高。本研究以IL-6分布刺激来源于OLP患者与健康人的Treg细胞,发现OLP患者Treg细胞Stat3的磷酸化水平升高,提示,与对照组比较,OLP患者来源的Treg细胞对IL-6的敏感性更高。总之,本项目的研究结果显示,OLP患者抗原提呈细胞IL-6分泌水平升高,且OLP患者Treg细胞对IL-6的敏感性增高;二者的效果叠加后,IL-6展示出对Treg细胞的功能抑制作用,导致OLP患者体内Treg细胞功能缺陷,即使OLP患者Treg细胞数量存在补偿性提高,却依然无法发挥有效的负性免疫调节作用。本项目的结果提示,IL-6导致的Treg细胞功能缺陷可能是OLP慢性炎症迁延不愈和反复发作的原因。
期刊论文列表
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专利列表
Integrative analysis of mRNA and miRNA expression profiles in oral lichen planus: preliminary results
口腔扁平苔藓中 mRNA 和 miRNA 表达谱的综合分析:初步结果
DOI:10.1016/j.oooo.2017.05.513
发表时间:2017-10-01
期刊:ORAL SURGERY ORAL MEDICINE ORAL PATHOLOGY ORAL RADIOLOGY
影响因子:2.9
作者:Chen, Junjun;Du, Guanhuan;Tang, Guoyao
通讯作者:Tang, Guoyao
DOI:--
发表时间:2017
期刊:临床口腔医学杂志
影响因子:--
作者:杜观环;王宇峰;曹天翼;周磊磊;唐国瑶
通讯作者:唐国瑶
Frequently Increased but Functionally Impaired CD4+CD25+Regulatory T Cells in Patients with Oral Lichen Planus
口腔扁平苔藓患者的 CD4 CD25 调节性 T 细胞经常增加但功能受损
DOI:10.1007/s10753-016-0356-9
发表时间:2016-06-01
期刊:INFLAMMATION
影响因子:5.1
作者:Zhou, Leilei;Cao, Tianyi;Tang, Guoyao
通讯作者:Tang, Guoyao
Downregulated miR-27b promotes keratinocyte proliferation by targeting PLK2 in oral lichen planus
下调miR-27b通过靶向口腔扁平苔藓中的PLK2促进角质形成细胞增殖
DOI:10.1111/jop.12826
发表时间:2019-04-01
期刊:JOURNAL OF ORAL PATHOLOGY & MEDICINE
影响因子:3.3
作者:Chen, Junjun;Du, Guanhuan;Tang, Guoyao
通讯作者:Tang, Guoyao
DOI:--
发表时间:2017
期刊:临床口腔医学杂志
影响因子:--
作者:孙倩倩;魏崴;王宇峰;唐国瑶
通讯作者:唐国瑶
口腔黏膜上皮界面炎症微环境中的CD4+TRIM21hiT细胞经IL-6/Jak-Stat3信号通路调控调节性T细胞功能的机制研究
- 批准号:82020108010
- 项目类别:国际(地区)合作与交流项目
- 资助金额:248万元
- 批准年份:2020
- 负责人:唐国瑶
- 依托单位:
浆细胞样树突状细胞TLR9/IRF/IFN-α通路诱导T细胞表型分化在扁平苔藓中的致病机制研究
- 批准号:81970937
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2019
- 负责人:唐国瑶
- 依托单位:
上调miR-27b表达对口腔扁平苔藓上皮细胞凋亡的调节机制
- 批准号:81170967
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:60.0万元
- 批准年份:2011
- 负责人:唐国瑶
- 依托单位:
人PD-L2融合蛋白对角质形成细胞/T细胞共培养模型作用的研究
- 批准号:30872888
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:28.0万元
- 批准年份:2008
- 负责人:唐国瑶
- 依托单位:
国内基金
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