基于肿瘤微环境的骨髓间充质干细胞与卵巢癌干细胞的关联研究及靶向治疗

利用骨髓间充质干细胞(MSCs)的归巢特性，运载先期构建的新型选择性复制溶瘤病毒，静脉应用后能靶向聚集于肿瘤病灶，有效清除肿瘤原发及转移灶。然而，因何赋予MSCs归巢特性？MSCs归巢与肿瘤干细胞有无关联?能否应用MSCs的归巢特性开展针对肿瘤干细胞的靶向治疗,从而从源头解决制约肿瘤治疗进展的两大“瓶颈”――转移和耐药问题?.　　本项目从反应实体瘤真实状况的肿瘤微环境出发，原代分离术中取得的配对高级别上皮性卵巢癌原发灶、腹水和转移灶标本，利用磁珠分选结合流式分选技术分离鉴定卵巢癌微环境中的卵巢癌干细胞(CD133+Integrin A6+)、肿瘤细胞(CD133-Integrin A6-)、成纤维细胞(CD90+)和肿瘤相关血管内皮细胞(CD31+)；另一方面，原代分离、鉴定正常人骨髓间充质干细胞MSCs (CD44+CD105+)，趋化实验结果表明，正是肿瘤微环境中的卵巢癌干细胞介导了MSCs的归巢。进而引入细胞因子芯片新技术，发现卵巢癌干细胞分泌的IL-6活化Stat3信号通路（IL-6-Stat3-MMP2/9）是诱导MSCs的归巢的主要因素，抑制该通路上游的IL-6R、中和抗体封闭IL-6或抑制Stat3表达均可有效阻断MSCs的归巢。在卵巢癌治疗方面，我们利用MSCs的归巢特性和肿瘤干细胞DNA损伤检测点活性较高的特点，以Chk1/2为靶点，以卵巢癌干细胞为突破口，通过MSCs携带前期构建的反义ADV-Chk1/2溶瘤腺病毒载体M2和M3，靶向卵巢癌干细胞DNA损伤检测点，体内实验证实MSCs携带的溶瘤腺病毒载体（M2、M3）能够聚集于肿瘤局部，下调卵巢癌干细胞p-Chk1/2的表达，从而有效清除卵巢癌干细胞，抑制肿瘤转移和耐药。.　　本项目从应用角度探索了一条有效清除肿瘤干细胞，控制肿瘤转移和耐药治疗的新途径，解决了腺病毒基因治疗关键技术障碍，为最终实现靶向遏制肿瘤复发、转移和耐药的目的提供了理论支持。在项目执行期内，经费使用合理，除完成既定目标外还充实了研究内容，为所在实验室开创了卵巢癌微环境各组分原代细胞分离培养的新的技术平台。研究结果已发表SCI论文6篇，尚有4篇SCI文章待发表。